CCA-kasvatusalusta uudeksi testimenetelmäksi E. coli -bakteerien ja koliformisten bakteerien tutkimiseen
Toijanen, Jenna (2020)
Toijanen, Jenna
2020
All rights reserved. This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2020120125522
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2020120125522
Tiivistelmä
Opinnäyte tehtiin Aqva Finland Oy:n vesilaboratoriolle. Opinnäytetyön tavoitteena oli löytää uusi edullisempi testimenetelmä E. coli -bakteerien ja koliformisten bakteerien tutkimiseen vesinäytteistä. Testimenetelmien toimivuutta, hintaeroja, vahvuuksia sekä heikkouksia vertailtiin ennen uuden menetelmän valintaa. Vertailuun valikoituivat IDEXX Colilert*-18-, 3M AQCC Petrifilm- ja VWR CCA-testimenetelmät. Kolmen testimenetelmän kasvatusalustojen soveltuvuuskokeita suoritettiin Aqvan vesilaboratoriossa.
Koliformiset bakteerit ovat gramnegatiivisia sauvabakteereita, jotka ovat fakultatiivisesti anaerobisia sekä oksidaasinegatiivisia. Koliformisiin bakteereihin kuuluu monia eri bakteerisukuja, kuten Escherichia-, Klebsiella- ja Citrobacter-sukujen lajit. Koliformiset bakteerit voivat olla peräisin maaperästä, teollisuusjätevesistä tai kasveista, lukuun ottamatta E. coli -bakteeria, joka aina kertoo veden ulosteperäisestä saastumisesta. E. coli -bakteerit ovat lämpökestoisia koliformisia bakteereita, joita tavataan vain ihmisten ja tasalämpöisten eläinten ulosteessa.
Testivaiheessa kasvatettiin tunnettuja bakteeripitoisuuden omaavia näytevesiä eri kasvatusalustoilla. 3M AQCC Petrifilm-kasvatusalusta ei soveltunut uudeksi testimenetelmäksi, koska testien aikana selvisi, että alusta ei kestänyt kloorin neutralisointiin käytettävää natriumtiosulfaattia. Uudeksi testimenetelmäksi valikoitui VWR-valmistajan CCA-kasvatusalusta, joka toimi testivaiheessa parhaiten eikä alusta häiriintynyt kloorin neutralisointiaineesta.
CCA-kasvatusalustan tulokset olivat onnistuneita. Kasvatusalustalla kasvoi tyypillisiä sinisinä E. coli -bakteeripesäkkeitä sekä punaisia koliformisten bakteerien pesäkkeitä. Punaiset koliformiset bakteeripesäkkeet varmistettiin oksidaasitestillä virhepositiivisen tuloksen varalta.
Aqvan vesilaboratorio päätti jatkaa CCA-kasvatusalustan lisätestauksia, jotta se voitaisiin verifioida laboratorion uudeksi viralliseksi testimenetelmäksi. Verifioinnin jälkeen FINAS-akkreditointipalvelu arvioi testimenetelmän verifiointisuunnitelman ja hyväksyttää sen vaatimukset täyttäväksi testimenetelmäksi.
Koliformiset bakteerit ovat gramnegatiivisia sauvabakteereita, jotka ovat fakultatiivisesti anaerobisia sekä oksidaasinegatiivisia. Koliformisiin bakteereihin kuuluu monia eri bakteerisukuja, kuten Escherichia-, Klebsiella- ja Citrobacter-sukujen lajit. Koliformiset bakteerit voivat olla peräisin maaperästä, teollisuusjätevesistä tai kasveista, lukuun ottamatta E. coli -bakteeria, joka aina kertoo veden ulosteperäisestä saastumisesta. E. coli -bakteerit ovat lämpökestoisia koliformisia bakteereita, joita tavataan vain ihmisten ja tasalämpöisten eläinten ulosteessa.
Testivaiheessa kasvatettiin tunnettuja bakteeripitoisuuden omaavia näytevesiä eri kasvatusalustoilla. 3M AQCC Petrifilm-kasvatusalusta ei soveltunut uudeksi testimenetelmäksi, koska testien aikana selvisi, että alusta ei kestänyt kloorin neutralisointiin käytettävää natriumtiosulfaattia. Uudeksi testimenetelmäksi valikoitui VWR-valmistajan CCA-kasvatusalusta, joka toimi testivaiheessa parhaiten eikä alusta häiriintynyt kloorin neutralisointiaineesta.
CCA-kasvatusalustan tulokset olivat onnistuneita. Kasvatusalustalla kasvoi tyypillisiä sinisinä E. coli -bakteeripesäkkeitä sekä punaisia koliformisten bakteerien pesäkkeitä. Punaiset koliformiset bakteeripesäkkeet varmistettiin oksidaasitestillä virhepositiivisen tuloksen varalta.
Aqvan vesilaboratorio päätti jatkaa CCA-kasvatusalustan lisätestauksia, jotta se voitaisiin verifioida laboratorion uudeksi viralliseksi testimenetelmäksi. Verifioinnin jälkeen FINAS-akkreditointipalvelu arvioi testimenetelmän verifiointisuunnitelman ja hyväksyttää sen vaatimukset täyttäväksi testimenetelmäksi.