Valkosolusopivuuskokeen pystytys ja validointi Beckman Coulterin Navios™-virtaussytometrille
Huovinen, Minna (2013)
Huovinen, Minna
Metropolia Ammattikorkeakoulu
2013
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2013120219320
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2013120219320
Tiivistelmä
Opinnäytetyö tehtiin Punaisen Ristin Veripalvelulle. Työn tavoitteena oli pystyttää ja validoida valkosolusopivuuskoemenetelmä Beckman Coulterin Navios™ -virtaussytometrille. Menetelmää hyödynnetään mm. munuaisensiirron jälkeisessä hoidossa, jos siirretty munuainen ei käynnisty normaalilla tavalla tai epäillään hyljintää. Tarkoituksena oli luoda Navios™ -virtaussytometrille oikeat asetukset valkosolusopivuuskoemenetelmälle ja määrittää positiiviset raja-arvot (T- ja B-IgG sekä T-IgM). Valittiin uudet T- ja B-solumerkkiaineet, jotka fluoresoivat selkeästi eri aallonpituutta, jolloin vältytään hankalilta ajoasetusten säädöiltä. Pystytyksen jälkeen menetelmä validoitiin. Aineistona käytettiin perifeerisen veren soluja, syväjäässä säilytettyjä elinluovuttajan pernan soluja sekä pakastettuja munuaispotilaiden seeruminäytteitä. Seerumit oli valittu siten, että mukana oli negatiivisia, heikosti positiivisia ja vahvasti positiivisia näytteitä. Analyysisarjoissa oli mukana myös tunnettu negatiivinen kontrolli sekä tunnettu positiivinen kontrolli, joiden perusteella analysoitiin menetelmän toistotarkkuutta. Asetettujen hyväksymiskriteerien ja tavoitteiden avulla, validoinnissa saadut tulokset herkkyys (sensitiivisyys) ja tarkkuus (spesifisyys) oli tavoitteiden mukaiset. Tulokset vastasivat käytössä olevalla menetelmällä saatuja alkuperäisiä tuloksia ja menetelmä voitiin ottaa käyttöön.