FGF23 proteiinin tutkimustulosten luotettavuuden ja prosessin laadunarviointi

Abstract

Opinnäytetyön tarkoituksena oli havainnoida laatua ja toistettavuutta mitattaessa FGF23 proteiinia manuaalisella ELISA -menetelmällä. Tutkimusprojektissa mitattiin osana kansainvälistä tutkimusta 2049 potilasnäytettä viidenkymmenenviiden ELISA -kitin avulla. Osallistuimme kittien tekoon tekemällä yhteensä 10 kittiä eli analysoimalla yhteensä 380 näytettä. Saimme aiheen ValiRx Finland Oy:ltä (ValiFinn), joka on Oulussa toimiva bioteknologia-alan yritys.

Laadunhallinta on tärkeässä roolissa kaikissa tutkimuksissa. Projektissa havainnoimme mittausprosessin ja -tulosten laatua sekä toistettavuutta. Opinnäytetyössä perehdyimme siihen, kuinka varmistetaan näytteiden käsittelyn ja mittausolosuhteiden yhteneväisyys sekä tulosten tarkkuus, kun käsiteltiin ja mitattiin suuria näytemääriä eri päivinä ja eri henkilöiden toimesta. Tavoitteena oli havainnoida tekijöiden toimintatapoja, mittaustulosten vertailukelpoisuutta sekä toistettavuutta ja laboratorioprosessien laadunhallintaa.

Tietoperustassa käsittelimme tutkimusprojektissa laadunvarmistukseen ja laadunarviointiin käytettäviä menetelmiä. Menetelmien avulla arvioimme tutkimusprosessin ja mittaustulosten laatua. Prosessin laadunarviointi perustui havainnointiin, työntekijöiden lausuntoihin ja pitämäämme tutkimuspäiväkirjaan. Tulosten vertailukelpoisuutta arvioitiin rinnakkaisnäytteiden, standardien ja kontrollien avulla.

Arvioinnin ja vertailun perusteella tuloksia voitiin pitää luotettavina. Havaitsimme, että eri päivinä ja eri henkilöiden tekeminä mittaustulosten välillä ei ollut merkittäviä eroja. Kontrollien ja standardien tuloksissa ei ollut suuria eroja ja niiden arvot pysyivät tavoiterajoissa. Rinnakkaisnäytteiden väliset erot tarkastettiin, koska liian suuria eroja tuloksissa ei voitu pitää luotettavina. Mittauksissa onnistuttiin sekä tulosten toistettavuudessa että työtapojen erojen minimoimisessa. Tulosten tarkastelun ja havainnoinnin perusteella työprojektissa onnistuttiin pääosin vakioimaan työvaiheet niin, että eri henkilöt suorittivat työt samalla tavalla, samoissa olosuhteissa ja samoilla menetelmillä, vaikka joitakin yksittäisiä näytteitä jouduttiin uusimaan korkeiden rinnakkaisnäytteiden välisten erojen takia.

The purpose of the thesis was to observe the quality and reproducibility when measuring the protein FGF23 with a manual ELISA method. This project was part of an international research, where 2049 clinical specimens were measured with 55 ELISA kits. We participated by doing 10 ELISA kits which was 380 specimens. The subject was given by ValiRx Finland Oy (ValiFinn).

Quality control plays crucial role in all important research projects. In this project we observed the quality and reproducibility of the research project and the results. We got acquainted, how to ensure the comparability of handling and measuring specimens and how to ensure the accuracy of results when big amounts of samples were measured by different researcher in several days. We aimed to observe the differences in the working methods as well as comparability and reproducibility of the test results.

In the content of the thesis we dealed with methods of the quality evaluation and quality control which we used in this research to create conclusions. The quality evaluation of the working methods were based on observation, researcher’s statements and research diary. Comparability of the test results were evaluated by comparing the results of duplicate samples, standards and controls.

Based on the evaluation and comparison the test results were reliable. In addition, we noticed that there were no significant differences between the test results made by different researcher in different days. There were no major divergences in the controls or standards and they were within the desired values. Duplicate results were also checked. If there were high disparities in same duplicates, the results were not reliable. In conclusion, the measurements were successful considering the reproducibility of the results and validation of the working methods. On the other hand, few individual needed remeasurement, but those samples were minimal part of the total amount.