SLS-menetelmän ja The Hemoglobin Assay kitin soveltuvuuden testaus hemoglobiinin määrittämiseen syljestä : Kvantitatiivinen tutkimus

Abstract

Tutkijat ennustavat sylkinäytteen nousevan verinäytteen rinnalle sen helppouden ja hyödyllisyyden ansiosta. Sylkinäytteestä löytyy samoja proteiineja, kuin verestä, ja siitä voidaan tutkia myös hormoneja, vasta-aineita, sekä muita rutiinina veren seerumista tutkittavia molekulaarisia komponentteja. Yksi näistä tutkittavista proteiineista on hemoglobiini. Veren, eli myös hemoglobiinin, löytyminen syljestä voi kertoa esimerkiksi ientulehduksesta. Koska veren määrää syljestä ei voi suoraan määrittää, on analyytiksi valittava jokin veren komponentti, kuten hemoglobiini. Opinnäytetyö tehtiin toimeksiantona ja tarkoituksena oli löytää menetelmä, jolla hemoglobiinin määrää syljessä voitaisiin mitata mahdollisimman tarkasti. Tutkittaviksi menetelmäksi valittiin Sysmex-analysaattorin käyttämä SLS-menetelmä ja Sigma-Aldrichin The Hemoglobin Assay kit.

Tavoitteena oli selvittää, sopiiko SLS-menetelmä hemoglobiinin määrittämiseen syljestä, sekä verrata sen ominaisuuksia The Hemoglobin Assay kittiin. Tarkoituksena oli saada selville menetelmien soveltuvuus sylkinäytteen analysoimiseen ja testata menetelmien herkkyyttä matalien hemoglobiinikonsentraatioiden suhteen. Tavoitteena oli tuottaa yritykselle tutkimustietoa kolorimetristen menetelmien käytöstä sylkinäytteen analysoimiseen.

Tutkimuksessa analysoitiin veteen liuotettua kaupallista hemoglobiinia, kokoveri- ja sylkinäytteitä, ja niistä saatuja tuloksia verrattiin keskenään.

Tutkimustulostemme mukaan SLS-menetelmällä voidaan mitata sylkinäytteitä. Kuitenkin sen herkkyys ei riitä pienten hemoglobiinikonsentraatioiden mittaukseen ja syljen matriisivaikutus häiritsee mittausta. The Hemoglobin Assay on herkempi, kuin SLS-menetelmä, mikä tekee siitä paremman menetelmän sylkinäytteen mittaamiseen.

Researchers predict that the saliva sample will generalize along with blood sample because of its beneficial and easy features. Saliva contains some of the same proteins as blood. Some of the hormones, antibodies and other molecular components that are regularly detected from blood serum can be detected from saliva. One of these proteins is hemoglobin. Finding blood, ergo hemoglobin, can be sign from gingivitis. Because level of blood can’t be directly detected from saliva, one component of blood must be chosen to be the analyte. The point of this thesis was to find a method that can be used to define the levels of hemoglobin from saliva sample as exact as possible. The SLS-method used by Sysmex-analyzer and The Hemoglobin Assay kit of Sigma-Aldrich were chosen as examinee methods.

The objective of the research was to find out if the SLS-method is suitable for defining the concentration of saliva hemoglobin levels and compare the features of SLS-method to features of The Hemoglobin Assay kit. The aim was to find out how suitable methods are for detecting hemoglobin levels of saliva samples and check the sensitivity of methods to use in detecting low concentration of hemoglobin from saliva sample. The objective of the study was to produce research data about using colorimetric methods to detect hemoglobin level in saliva.

Results from Sysmex-analyzer, spectrophotometer and ELISA-multichannel spectrophotometer were used as a research material. Commercial hemoglobin dissolved in water, blood and saliva were used as specimens in the study. The results from these were compared.

According to the study SLS-method can be used to detect hemoglobin levels of saliva. However, the sensitivity of the SLS-method is not good enough, so the small levels of hemoglobin can’t be analyzed with it. The SLS-method was also more disturb by the impact of matrix of the saliva. The sensitivity of The Hemoglobin Assay kit is more accurate and so it’s more suitable for detecting the hemoglobin levels of saliva.