GHbA1c-määritysten vertailua kolmella eri analysaattorilla : Bio-Rad Variant TM II Haemoglobin Testing System, Bio-Rad D-10 TM Dual Program ja DCA 2000®+.

Abstract

Diabetes on aineenvaihdunnan sairaus, jossa veren glukoosipitoisuus kasvaa liian suureksi. Diabeteksen kaksi päämuotoa ovat tyypin 1 diabetes ja tyypin 2 diabetes. Pitkäaikainen liian korkea verensokeri johtaa elimistön proteiinien glykoitumiseen, mikä voi aiheuttaa elinmuutoksia silmissä, munuaisissa ja hermoissa sekä sydän- ja verenkiertoelimistössä. Terveyden kannalta on tärkeää, ettei glukoosin määrä veressä vaihtele liikaa. Siksi diabeteksen hoidossa puhutaan paljon hyvästä hoitotasapainosta. Hyvä hoitotasapaino on paras keino torjua komplikaatioita. Diabeteksen hoitotasoa seurataan hemoglobiinin glykoitumista kuvaavalla laboratoriotutkimuksella (GHbA1c). GHbA1c:n määritysmenetelmiä on käytössä noin viisitoista. Menetelmien suuri määrä ja standardisoinnin puute aiheuttavat sen, että GHbA1c-tulokset eri laboratorioiden välillä vaihtelevathuomattavasti menetelmästä riippuen. Lisäksi GHbA1c:n määrittämistä vaikeuttaa hemoglobiinivarianttien esiintyminen tutkittavissa näytteissä. Nämä hemoglobiinivariantit voivat joko nostaa tai laskea GHbA1c-tulosta riippuen käytetystä määritysmenetelmästä. Diabeetikon hoitotasapainon kannalta on erittäin tärkeää, että saadut GHbA1c-tulokset ovat luotettavia. Tässä opinnäytetyössä verrataan kolmen eri analysaattorin tulostasoa ja toistettavuutta määrittämällä GHbA1c -pitoisuutta plasmanäytteistä. Nämä analysaattorit ovat Bio-Rad Variant TM II Hemoglobin Testing System, Bio-Rad D-10 TM Dual Program ja DCA 2000®+. DCA 2000®+ -analysaattori perustuu immunokemialliseen menetelmään ja kaksi ensimmäistä korkean erotuskyvyn nestekromatografiseen menetelmään (HPLC). Työhön kuuluu myös Keski-Suomen alueella esiintyvän tuntemattoman hemoglobiinivariantin erottaminen ja selvittäminen. Tuloksia tarkastellaan lineaarisen regression avulla. Tutkimuksessamme käyilmi, että Variant II TM ja D-10 TM antavat samantasoisia tuloksia. Näiden analysaattoreiden heikkoutena on, että ne eivät pysty erottamaan Keski-Suomen alueella esiintyvää hemoglobiinivarianttia. DCA 2000®+ on kolmesta vertailtavasta laitteesta luotettavin, jos näytteessä esiintyy hemoglobiinivariantti.

Diabetes is a metabolic condition in which the amount of glucose inblood is too high. There are two main types of diabetes: type 1 diabetes and type 2 diabetes. Long-term high blood glucose level leads to protein glycation in vivo, which can cause damage to eyes, kidneys, nerves, heart and major arteries.The main aim of treatment of diabetes is to achieve blood glucose as near to normal as possible. A good long-term glycaemia control is the best way to prevent complications related to diabetes. Measurement of glycated haemoglobin (GHbA1c) is a common procedure for evaluating long-term control of diabetes. About fifteen methods for the determination of GHbA1c are commercially available to clinicallaboratories. Due to large number of methods and the lack of international standardization GHbA1c values vary considerably between methods. The measurement of GHbA1c can be affected by haemoglobin variants present in diabetic patients. These haemoglobin variants may falsely increase or decrease GHbA1c results depending on the method used. The optimal therapy of diabetic patients requires validated GHbA1c methods. In this thesis we compare GHbA1c results by three different analyzers. These analyzers are Bio-Rad Variant TM II Haemoglobin Testing System, Bio-Rad D-10 TM Dual Program and DCA 2000®+. The DCA 2000®+ is based on immunoassay and the first two are based on high performance liquid chromatography (HPLC).This study also includes the separation and identification of haemoglobin variant existing in Central Finland. The results are examined by linear regression. Our study shows that Variant II TM and D-10 TM give very similar results but theylack the resolution necessary to differentiate the haemoglobin variant existingin Central Finland. The DCA 2000®+ is the most reliable analyzer if haemoglobinvariant is present in the sample.