Hiiren TSH-reseptorigeenin pistemutaatio : geenikonstruktin rakentaminen

Abstract

TSH-reseptorigeenin mutaatiot, jotka saavat aikaan reseptorin muuttumisen konstitutiivisesti aktiiviseksi eli aktiiviseksi ilman tyreotropiinihormonia, ovat merkittävin molekyylitason syy kilpirauhasen liikatoiminnan eli hypertyreoosin taustalla. Opinnäytetyö on osa laajempaa tutkimusta, jonka tavoitteena on selvittää hypertyreoosin etiologiaa ja patogeneesia, joka ei johdu autoimmuniteetistä. Tämän opinnäytetyön tarkoituksena oli rakentaa geenitekniikan avulla geenikonstrukti, jossa TSH-reseptorigeeniin on tehty pistemutaatio, joka johtaa reseptorissa D633H mutaatioon. D633H-mutaatio valittiin siksi, että se on tunnistettu potilailla, joilla on toksinen kilpirauhaskyhmy. D633H-mutaatiossa asparagiinihappo (D) on vaihtunut histidiiniksi (H). Tässä opinnäytetyössä tutkimustehtävää ei saatu valmiiksi, koska käytännön suorituksen aikana kohdattiin monia ongelmia.

The TSH receptor gene mutations that cause constitutively active mutations of the receptor are the major molecular causes of nonautoimmune hyperthyroidism. This thesis is a part of a larger study aiming to determine the aetiology and pathogenesis of hyperthyroidism, which is not caused by autoimmunity. The purpose of this thesis was to create through genetic engineering a gene construct where a point mutation leads to D633H mutation in the TSH receptor gene. The D633H mutation was chosen because it has been identified in patients with toxic thyroid nodules (TTNs). In D633H mutation aspartic acid (D) has changed to histidine (H). The research could not be completed thoroughly in this thesis, since many problems were encountered during the practical work that hindered the actual research process.