Ionisoituneen kalsiumin säilyvyys : sentrifugoimattomassa näytteessä

Abstract

Ionisoitu kalsium (Ca-Ion) on plasmassa vapaana kiertävää kalsiumia, jonka pitoisuutta säätelevät parathormoni ja 1,25-dihydroksi-D-vitamiini. Ionisoitua kalsiumia käytetään hoidon seurannassa esimerkiksi munuaisten vajaatoiminnasta kärsivillä, leikkauksesta toipuvilla ja tehohoitopotilailla. Näissä tilanteissa kalsiumin sitoutuminen proteiineihin on poikkeavaa, ja siksi kalsiumpitoisuudesta ei saada luotettavia tuloksia muilla menetelmillä. Ionisoitu kalsium on herkkä pH-muutoksille. Muutosten minimoimiseksi näyte säilytetään anaerobisesti ja sentrifugoidaan tunnin kuluessa näytteenotosta.

Opinnäytetyön tarkoituksena oli verrata 4, 8 ja 24 tunnin ajan sentrifugoimattomana säilytettyjä näytteitä tunnin sisällä sentrifugoituun näytteeseen. Lisäksi vertailtiin huoneenlämmössä ja jääkaapissa säilytettyjä näytteitä keskenään. Tämän opinnäytetyön toimeksiantaja oli Etelä-Pohjanmaan sairaanhoitopiirin kliinisen kemian tutkimusyksikkö, jossa tutkimukseen kerätyt näytteet analysoitiin Radiometer ABL90 Flex- verikaasuanalysaattoreilla. Tulosten laskennallinen analyysi tehtiin Excel- taulukkolaskentaohjelmalla keskittyen biasprosentteihin sekä biasyksiköihin.

Tuloksia vertailtiin jokaisen analyytin kohdalla (pH, Ca-Ion ja pH-korjattu Ca-Ion). Tulokset osoittivat, että pH on näytteissä eniten muuttuva analyytti ja sen muutos vaikuttaa samalla koko S-Ca-Ion tutkimuksen tuloksiin. Jopa vain 4 tunnin ajan säilytettyjen näytteiden pH säilyi huonosti varsinkin huoneenlämmössä. Ionisoitu kalsium sekä pH-korjattu ionisoitu kalsium säilyivät keskimäärin tyydyttävästi 4 tuntia sentrifugoimattomana molemmissa säilytyslämpötiloissa. Kaikki tutkittavat analyytit säilyivät huonosti 8 ja 24 tunnin ajan molemmissa lämpötiloissa.

Opinnäytetyön tutkimuksen tulokset osoittivat pH:n muuttuvan näytteissä eniten, ja sen vuoksi jatkotutkimusaiheena voitaisiin keskittyä vain pelkän pH:n säilymiseen. Potentiaalisena jatkotutkimusaiheena voisi olla myös vastaava tutkimus, jossa keskityttäisiin lyhyempiin säilytysaikoihin. Näin saataisiin tietoa siitä, mihin aikapisteeseen asti näytteet pysyvät lähes muuttumattomina, kun verrataan tunnin sisällä sentrifugoituun näytteeseen.

Ionized calcium (Ca-Ion) is a free-circulating calcium in plasma that is regulated by the parathyroid hormone and 1,25-dihydroxyvitamin D. Ionized calcium is used to monitor treatment, for example, in patients with renal insufficiency, recovering from surgery, and intensive care patients. In these situations, the binding of calcium to proteins is abnormal, and therefore, reliable results on calcium concentration are not obtained by other methods. Ionized calcium is sensitive to changes in pH. To minimize changes, the sample is stored anaerobically and centrifuged within one hour of sampling.

The purpose of this thesis was to compare samples stored without centrifugation for 4, 8, and 24 hours with a sample centrifuged within one hour. In addition, samples stored at room temperature and refrigerated were compared. This thesis was commissioned by the Clinical Chemistry Research Unit of the South Ostrobothnia Hospital District, where the samples collected for the study were analyzed with Radiometer ABL90 Flex blood gas analyzers. The computational analysis of the results was performed with an Excel spreadsheet pro-gram focusing on bias percentages and bias units.

The results were compared for each analyte (pH, Ca-Ion and pH-adjusted Ca-Ion). The results showed that pH is the most variable analyte in the samples and that its change also affects the results of the whole S-Ca-Ion analysis. The pH of the samples stored for only 4 hours was poorly maintained, especially at room temperature. The ionized calcium, as well as the pH-adjusted ionized calcium, remained satisfyingly for an average of 4 hours at both storage temperatures. All analytes tested were poorly preserved for 8 and 24 hours at both temperatures.

The results of the thesis showed that the pH changes in the samples the most, and therefore the preservation of pH alone could be the subject of further research. A similar study focusing on shorter storage time could also be a potential topic for further research. This would provide information on the point at which the samples remain virtually unchanged when compared to a sample centrifuged within an hour.