Lateraalivirtaustestien valmistus ja testaus
Pohjonen, Sari (2020)
2020
All rights reserved. This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2024060621661
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2024060621661
Tiivistelmä
Opinnäytetyö tehtiin Teknologian tutkimuskeskus VTT:llä Biosensorit-tiimissä erikoistutkija FT Anu Mursulan ohjaamana. Työ oli osa useampaa käynnissä ollutta projektia, joissa tavoitteena oli kehittää lateraalivirtaustestien valmistamista ja testaamista. Työn tavoitteena oli siis lateraalivirtaustestien valmistusprosessin kehitys.
Työssä optimoitiin eri lateraalivirtaustestimateriaaleja, testin valmistusprosessia uuden leikkurin avulla ja leimavasta-aineen annostelua suoraan testitikulle konjugaattipadille. Työssä mallianalyyttina käytettiin C-reaktiivista proteiinia ja sen suoraa immunoreaktiota, joka todistettiin fluoresoivalla leimavasta-aineella. Työssä tutkittiin myös mallianalyytin herkkyyttä. Tavoite oli valmistaa kvantitatiivinen testi. Tavoite oli myös selvittää testin toimivuus eri näytematriiseilla, joita olivat seerumi ja kokoveri.
Työn päätavoitteet saavutettiin. Eri materiaalien vaikutuksia testeihin saatiin selville ja valmistusprosessia saatiin optimoitua nopeammaksi ja helpommaksi uuden leikkurin avulla ja leimavasta-aineen annostelulla suoraan testitikulle. Huomattiin, että testikehityksessä on vielä optimoitavaa. Leimavasta-aineen annosteluliuoksessa oli ollut liian paljon sokeria, ja se oli yksi syy, että leimavasta-aine ei levittynyt tasaisesti konjugaattipadille. Valmistusprosessia parantaisi oikeanlaisten laitteiden käyttö. Tulevaisuudessa on tarkoitus testata kliinisiä potilasnäytteitä kehitetyillä lateraalivirtaustesteillä ja verrata niitä laboratoriossa tehtyihin testeihin. Thesis was made in VTT Technical Research Centre of Finland in Biosensors team. Senior scientist Anu Mursula was supervisor of the thesis. Thesis was a part of couple ongoing projects. One goal in the projects was developed manufacturing process and testing of lateral flow tests. Goal in thesis was developed manufacturing process of lateral flow test.
One goal in thesis was study and optimize different materials of lateral flow tests. Also goal was to develop manufacturing process with new guillotine cutter for cutting the test strips. Dispensing labelled antibody to straight to the conjugate pad was studied in this thesis also. Analyte in this thesis was C-reactive protein and its fluoroimmunoassay reaction. Sensitivity of analyte was studied. Goal was developed quantitative test. Effect on different sample matrix in test performance was studied. Different sample matrix were serum and whole blood.
Primary aim in this thesis was reached. Understanding of different lateral flow test materials was grown. New guillotine cutter was speeding the manufacturing process. Dispensing labelled antibody to conjugate pad was speeding the time of test performance. There is still optimizing to do with test development. Dispensing solution for the labelled antibody was too concentrated with sugar and that was one reason that labelled antibody was not uniformly distributed to the conjugate pad. Using designed equipment for dispensing antibodies would improve the manufacturing process. In the future aim is to test clinical patient samples with developed lateral flow tests and compare results for laboratory test results.
Työssä optimoitiin eri lateraalivirtaustestimateriaaleja, testin valmistusprosessia uuden leikkurin avulla ja leimavasta-aineen annostelua suoraan testitikulle konjugaattipadille. Työssä mallianalyyttina käytettiin C-reaktiivista proteiinia ja sen suoraa immunoreaktiota, joka todistettiin fluoresoivalla leimavasta-aineella. Työssä tutkittiin myös mallianalyytin herkkyyttä. Tavoite oli valmistaa kvantitatiivinen testi. Tavoite oli myös selvittää testin toimivuus eri näytematriiseilla, joita olivat seerumi ja kokoveri.
Työn päätavoitteet saavutettiin. Eri materiaalien vaikutuksia testeihin saatiin selville ja valmistusprosessia saatiin optimoitua nopeammaksi ja helpommaksi uuden leikkurin avulla ja leimavasta-aineen annostelulla suoraan testitikulle. Huomattiin, että testikehityksessä on vielä optimoitavaa. Leimavasta-aineen annosteluliuoksessa oli ollut liian paljon sokeria, ja se oli yksi syy, että leimavasta-aine ei levittynyt tasaisesti konjugaattipadille. Valmistusprosessia parantaisi oikeanlaisten laitteiden käyttö. Tulevaisuudessa on tarkoitus testata kliinisiä potilasnäytteitä kehitetyillä lateraalivirtaustesteillä ja verrata niitä laboratoriossa tehtyihin testeihin.
One goal in thesis was study and optimize different materials of lateral flow tests. Also goal was to develop manufacturing process with new guillotine cutter for cutting the test strips. Dispensing labelled antibody to straight to the conjugate pad was studied in this thesis also. Analyte in this thesis was C-reactive protein and its fluoroimmunoassay reaction. Sensitivity of analyte was studied. Goal was developed quantitative test. Effect on different sample matrix in test performance was studied. Different sample matrix were serum and whole blood.
Primary aim in this thesis was reached. Understanding of different lateral flow test materials was grown. New guillotine cutter was speeding the manufacturing process. Dispensing labelled antibody to conjugate pad was speeding the time of test performance. There is still optimizing to do with test development. Dispensing solution for the labelled antibody was too concentrated with sugar and that was one reason that labelled antibody was not uniformly distributed to the conjugate pad. Using designed equipment for dispensing antibodies would improve the manufacturing process. In the future aim is to test clinical patient samples with developed lateral flow tests and compare results for laboratory test results.