Analyysilaitteen testaus ja verifiointi IVD-käyttöön

Abstract

Työn tavoitteena oli karakterisoida IEF-yksikkö päivitettäessä laitteistoa uudempaan. Isoelektristä fokusointi –yksikköä käytetään hemoglobinopatioiden diagnosoimiseen. Hemoglobinopatioita ovat esimerkiksi eri talassemiat ja sirppisoluanemia. Karakterisointi oli työn käytännön osuudessa ja muut vaiheet käsiteltiin teoreettisesti. Yksiköllä ajetaan agaroosigeelejä, joiden päälle pipetoidaan verinäytteitä sekä kontrolleja. Kun geeliin syötetään sähkövirtaa, varaukselliset molekyylit kulkeutuvat geelillä kohti omaa pI-pistettään. Kulkeutumisen mahdollistaa pH-gradientti, jonka geelin kantaja-amfolyytit muodostavat.

Työssä karakterisoitiin ensin vanhan laitteen jäähdytyslevyn jäähdytysteho sekä veden virtaus. Sen jälkeen karakterisoitiin teholähteen syöttämää virtaa geeliajon ollessa käynnissä. Niitä verrattiin uuteen laitteeseen. Lisäksi molemmilla suoritettiin eri olosuhteissa geeliajoja ja verrattiin kontrollien ajautumista eri laitteiden välillä. Työssä käytettiin AFSC-, FAS- sekä Hb 610 –kontrolleja. Kontrollien vyöhykkeiden välisiä etäisyyksiä mitattiin työntömitalla ja verrattiin niitä laadunvalvonnan spesifikaatioihin. Työssä oli yhteensä 76 eri testiä.

Lämpötilan ja tehon nostamisen vaikutukset laitteistojen erottelykykyyn olivat pieniä. Korkeampi lämpötila ja kosteus kuitenkin lisäsivät hajontaa ajautuvuudessa geelin sisällä. Työn tuloksista voidaan päätellä, että eri laitteet toimivat samalla tavalla ja molempia voidaan käyttää geeliajossa vesijäähdyttimen lämpötilan ollessa 8 °C – 14 °C. Karakterisoinnin perusteella Wallac Oy voi siirtyä verifiointivaiheeseen.

The objective of the thesis was to characterize the IEF unit when upgrading the equipment. The isoelectric focusing unit is used to help diagnose hemoglobinopathies such as thalassemias and sickle cell anemia. The characterization comprised the practical part of thesis, while other phases were considered in theory. The unit is used to run agarose gels, on to which blood samples and controls are pipetted. When electricity is conducted to the gel, charged molecules migrate on the gel toward their own pI point. Migration is possible due to the pH-gradient, created by the gel’s carrier ampholytes.

The cooling power and water flow of old unit’s cooling plate were characterized first. The next step was the characterization of the power supply’s conducting ability during the gel processing. These parameters were compared to the new unit. The circumstances of the experiments were different and results of the experiments were compared between different units. AFSC, FAS and Hb 610 controls were used in the thesis project. The distance between bands was measured with a hand caliper and the results were compared to quality assurance specifications. In total 76 different experiments were conducted.

The effect of increased temperature and power on the separation ability of different units was small. However, higher temperature and humidity increased the dispersion inside gel. It can be concluded that different units function in the same way and both can be used to process the gels when the water circulation temperature is between 8 °C and 14 °C. On the basis of this thesis, Wallac Oy can initiate verification.