Säilytysajan ja -lämpötilan vaikutus perusverenkuva-, INR- ja APTT-tutkimuksiin

Abstract

Perusverenkuva on paljon käytetty tutkimus erilaisissa hematologisissa diagnooseissa ja tromboplastiiniajan INR-tulostusta käytetään varfariinilääkehoidon seurantaan. Molemmissa tutkimuksissa näytemäärä on suuri, ja näytteitä tulee Fimlab Laboratoriot Oy:lle paljon heidän omista toimipisteistään, mutta myös ulkopuolisista toimipisteistä postin tai kuriirin välityksellä. Aktivoitu partiaalinen tromboplastiiniaika on vähemmän tehty erikoissairaanhoidon tutkimus, mutta se otettiin mukaan opinnäytetyöhön, koska sen on aiemmin todettu säilyvän huonosti pidentyneitä aikoja.

Opinnäytetyön aihe saatiin Fimlab Laboratoriot Oy:lta, ja sen tarkoituksena oli tutkia PVK-, INR- ja APTT-näytteiden säilyvyyttä huoneenlämmössä ja jääkaapissa 24, 48 ja 72 tunnin ajan. Opinnäytetyön tavoitteena oli tuottaa tietoa, jota voidaan verrata kuljetuksissa esiintyviin olosuhteisiin. Näin voidaan arvioida mahdollisia preanalyyttisia virheitä ja tarvittaessa harkita säilytysohjeiden kehittämistä.

Opinnäytetyössä käytettiin kvantitatiivista kokeellista vertailevaa tutkimusmenetelmää. PVK-tutkimuksen aineistona oli 30 EDTA-putkea, joista tarkasteltiin parametrejä WBC, RBC, HCT, HGB, MCV, MCH, MCHC, PLT, PLT-O ja RDW-SD. Näytteille analysoitiin nollatilanne, jonka jälkeen ne jaettiin säilytysputkiin huoneenlämpöön ja jääkaappiin. Näytteet analysoitiin 24, 48 ja 72 tunnin säilytyksen jälkeen. INR- ja APTT-tutkimuksien aineistona oli 15 natriumsitraattiputkea, jotka sentrifugoitiin, ja eroteltu plasma jaettiin säilytysputkiin huoneenlämpöön ja jääkaappiin. Näytteet analysoitiin 24 ja 48 tunnin säilytyksen jälkeen.

Tutkimuksen perusteella voidaan todeta, että hematokriitti, MCV, MCHC ja RDW-SD eivät säily tutkimuskelpoisina vuorokauden huoneenlämpösäilytyksen jälkeen. Näistä MCHC laskee, ja muut parametrit nousevat. Näitä muutoksia ei tapahtunut jääkaapissa säilytetyissä vastinputkissa, ja jääkaapissa nämä parametrit olivat analysointikelpoisia vielä 72 tunnin jälkeen. Trombosyytit säilyivät hieman paremmin jääkaapissa kuin huoneenlämmössä. Hyytymistutkimuksista INR säilyy sekä huoneenlämmössä että jääkaapissa eroteltuna plasmana koko tutkimuksen ajan stabiilina, mutta APTT:ssa tapahtui merkittävää muutosta jo 24 tunnin säilytyksessä.

Opinnäytetyön luotettavuutta lisää se, että näytteet analysoitiin joka päivä samalla laitteella, ja kaikilla näytteillä oli säilytysputket sekä huoneenlämmössä että jääkaapissa. Luotettavuutta heikentää pieni otoskoko, jonka vuoksi opinnäytetyöstä ei voi tehdä yleistettyjä päätelmiä, mutta saadut tulokset tukevat aiemmin saatuja tutkimustuloksia. Jatkotutkimusaiheiksi nousivat esimerkiksi INR-näytteiden säilyvyys kokoverenä, INR-näytteiden pidempi säilytys tai PVK-näytteiden altistuminen lämpötilavaihteluille.

Complete blood count (CBC) is a laboratory analysis widely used in various haematological diagnoses, and prothrombin time with its INR-result is used to monitor the dosage of warfarin. The amount of blood samples required is high as both analyses are very common. A lot of samples are transported to Fimlab Laboratories from their own laboratory service sites, but also from other sources via mail or courier. Activated partial thromboplastin time is less common analysis used in specialized medical care, but it was included in this study because it has been noted to stay stable for a very short time.

This study was requested by Fimlab Laboratories and its purpose was to investigate the stability of CBC, INR and APTT when samples are stored at room temperature and in the refrigerator for 24, 48 and 72 hours. The aim of the study was to yield information that can be compared to the conditions of the transport lines of Fimlab Laboratories. This way possible preanalytical errors can be evaluated and developing the storing instructions can be considered if necessary.

A quantitative experimental comparative research method was applied in this study. CBC study consisted of 30 EDTA tubes, and the parameters included were WBC, RBC, HCT, HGB, MCV, MCH, MCHC, PLT, PLT-O and RDW-SD. CBC samples were analyzed at the same time to obtain a zero point, after which the sample was distributed into storage tubes. The samples were analyzed after 24, 48 and 72 hours. INR and APTT study consisted of 15 sodium citrate tubes which were centrifuged, and the separated plasma was distributed into storage tubes. The samples were analyzed after 24 and 48 hours.

Based on this study it can be concluded that HCT, MCV, MCHC and RDW-SD are not stable after 24 hours of storage at room temperature. MCHC drops while other parameters rise. These changes did not occur in the samples that were stored in refrigerator. Thrombocytes remained more stable at room temperature. INR-samples remained stable throughout the whole study in both storages, but APTT changed after 24 hours storing.

The samples were analysed with the same analyser each day, and all the samples had storage tubes in refrigerator and at room temperature, which increases the reliability of the thesis. Reliability is weakened due to a relatively a small sample size, resulting in the fact that generalized conclusions cannot be drawn based on this study. However, the results support previous research. Further research topics could include storing INR samples as whole blood, ensuring longer storage time for INR samples or researching how variation of temperatures could affect CBC samples.