Kylmävasta-aineiden tutkimusmenetelmien vertailu verikeskuksessa

Abstract

Opinnäytetyön tarkoituksena oli tarkastella eri geelikortteja, niiden käytettävyyttä ja eroavaisuuksia kylmävasta-aineita tutkittaessa. Kylmävasta-aineet ovat vasta-aineita, jotka reagoivat parhaiten ruumiinlämpöä viileämmissä lämpötiloissa. Ne ovat yleensä kliinisesti merkityksettömiä, mutta aiheuttavat hankaluuksia verensiirtoserologisissa tutkimuksissa. Ne voivat sekoittaa ABO-veriryhmämääritystä, aiheuttaa positiivisia autokontrolleja ja peittää alleen toisia kliinisesti merkityksellisiä vasta-aineita. Vasta-aineiden seulontaan ja tunnistukseen käytetään Suomessa yleisimmin pylväsagglutinaatiomenetelmään perustuvia kaupallisia geelikortteja. Opinnäytetyön aiheena oli vertailla Bio-Rad:in LISS/Coombs- ja NaCl/Enzyme-geelikorttien käytettävyyttä kylmävasta-aineiden tutkimisessa. Tarkoitus oli vertailla eroavatko näillä korteilla huoneenlämmössä saadut reaktiot ja reaktiovoimakkuudet toisistaan. Tarkoitus oli myös selvittää, eroavatko saadut reaktiot korttien välillä selvemmin antigeenin suhteen homo- tai heterotsygoottisten testisolujen kanssa. Työn tavoitteena oli tarjota Fimlab Laboratoriot Oy:n verikeskukselle lisätietoa LISS/Coombs- ja NaCl/Enzyme- geelikorttien käytettävyydestä kylmävasta-aineita tutkittaessa.

Teoreettisessa viitekehyksessä käsiteltiin veriryhmien ja vasta-aineiden taustaa, tarkemmin tarkasteltiin eri kylmävasta-aineet sekä vasta-aineiden tutkimiseen käytettävät menetelmät. Geelikorttien vertailu suoritettiin Fimlab Laboratoriot Oy:n Tampereen verikeskuksen keräämästä materiaalista, joka sisälsi tunnistamiseen käytettyjä antigeenikarttoja, sekä automaattianalysaattorin tulosteita. Materiaalista poimittiin huoneenlämmössä LISS/Coombs- ja NaCl/Enzyme-korteilla saadut reaktiot ja koottiin rinnakkain taulukoihin. Korttien vertailu suoritettiin näiden taulukoiden avulla. Vertailussa LISS/Coombs-kortilla saatiin positiivisia reaktioita enemmän kuin NaCl/Enzyme-kortilla. Korteilla saadut positiiviset reaktiot olivat myös voimakkuudeltaan vahvempia LISS/Coombs-kortilla. Systemaattisesti voimakkaampia reaktioita saatiin LISS/Coombs-kortilla erityisesti anti-M:n suhteen homotsygoottisilla testisoluilla.

Työstä saatujen tulosten perusteella voidaan tehdä johtopäätös, että kylmävasta-aineet tulevat huoneenlämpötilassa herkemmin esiin LISS/Coombs-kortilla kuin NaCl/Enzyme-kortilla. Tulosten perusteella erityisesti heikko anti-M tulee paremmin esiin LISS/Coombs-kortilla kuin NaCl/Enzyme-kortilla. Tämän tutkimuksen perusteella voidaan kylmävasta-aineiden seulonnassa ja tunnistuksessa suositella LISS/Coombs- ja NaCl/Enzyme-kortteja käytettävän rinnakkain. Aihetta kannattaisi tulevaisuudessa tutkia laajemmalla aineistolla ja anti-M:n lisäksi muillakin kylmävasta-aineilla.

The aim of this study was to compare LISS/Coombs- and NaCl/Enzyme-gel cards when testing cold-reactive antibodies in room temperature. The most common method for testing antibodies is commercial gel cards that use column agglutination method. The purpose was to compare reactions of a test cell with two different gel cards and the strength of the reaction. The aim was also to examine whether the reactions differ when the test cell is homotsygotic or heterostygotic towards anti-M. The purpose was to gather more information to Fimlab Laboratories Oy about testing cold-reactive anti-bodies in room temperature.

The data for this study were collected in the blood bank of Fimlab Laboratories Oy. The data included results of the tests conducted with two gel cards. The data consisted of the antigen profiles of the used test cells and prints from the results. Excel-tables were used to compare the results one test cell at a time. When comparing the two gel cards it was noticed that LISS/Coombs-cards had more positive reactions and stronger reactions than NaCl/Enzyme-cards. Especially test cells that were homotsygotic towards anti-M gave stronger positive reactions with LISS/Coombs-gel card.

The findings of this study indicate that cold-reactive antibodies are more sensitively shown with LISS/Coombs-gel card than NaCl/Enzyme- gel card in room temperature. Especially weak anti-M can be better shown with LISS/Coombs- gel card. As a conclusion based on this study the recommendation is to use both gel cards side by side when testing cold-reactive antibodies. For future studies it would be beneficial to use larger material with more than one cold-reactive antibody.