Rakennusmateriaalinäytteen mikrobikasvusto: menetelmävalidointi
Halttunen, Maija (2010)
Halttunen, Maija
Jyväskylän ammattikorkeakoulu
2010
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2010121518306
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2010121518306
Tiivistelmä
Opinnäytetyön toimeksiantaja oli Jyväskylän ammattikorkeakoulun (Jamk) rakennuslaboratorio. Työn ohjaajana toimi Jamk:ssa asiantuntijatehtävissä työskennellyt FT Kristian Jansson. Työn tavoitteena oli validoida kolmikohtainen menetelmä rakennusmateriaalinäytteen mikrobikasvuston toteamiseksi. Validoitavat menetelmät olivat suora mikroskopointi, suoraviljely ja laimennosviljely. Validoinnissa oli tarkoituksena selvittää miten eri tekniikat, liuokset, kasvatusalustat ja työn suorittajat vaikuttavat analyysituloksiin ja sitä, miten eri menetelmillä tuotetut analyysitulokset ja niistä vedetyt johtopäätökset vastaavat toisiaan.
Tutkimus toteutettiin talven ja kevään 2010 aikana analysoimalla eri rakennusmateriaalinäytteitä Asumisterveysoppaan ohjeiden ja Sisäilmastoseminaareissa vuosina 1999 ja 2005 julkaistujen raporttien mukaan. Rakennusmateriaalinäytteitä oli 16 kappaletta. Sieni-itiöt kasvatettiin 2 % mallasuute- ja dikloran-glyseroli-18-alustoilla. Bakteerit kasvatettiin tryptoni-hiivauute-glukoosi-alustalla. Suora mikroskopointi tehtiin näytteestä otetun teippipreparaatin avulla värjäämättömänä sekä värjättynä. Viljelyn jälkeen sienimaljoja inkuboitiin lämpökaapissa (25 °C) 7 vuorokautta ja bakteerimaljoja 7 + 7 vuorokautta. Inkuboinnin jälkeen maljoille kasvaneet pesäkkeet laskettiin ja tunnistettiin. Sieni-itiömaljoilta laskettiin erikseen homepesäkkeet ja hiivapesäkkeet, bakteerimaljoilta laskettiin sädesienet ja muut bakteerit erikseen.
Tulosten mukaan valituilla viljelymenetelmillä saadaan materiaalinäytteen mikrobisto kasvamaan. Suora mikroskopointi ei tuottanut mitään tulosta, vaikka näytteistä osa oli selvästi vaurioituneesta rakenteesta otettuja. Tuloksista pystyi päättelemään, että sekä suoraviljely- että laimennosviljelytekniikalla saadaan samansuuntaisia tuloksia. Tuloksiin vaikutti merkittävästi se, että analysoidut näytteet olivat vanhoja, ja vertailumateriaali puuttui.
The thesis was carried out at Jyväskylä University of Applied Sciences in winter and spring 2010.
The main aim was to validate a method consisting three parts for verifying fungi and bacterial
microbe growth in building material samples. The methods were direct microscopic observation,
direct culture method and dilution method for the culture. Validation was made to find out how
different techniques, solutions, agar bases and persons executing these tests have an affect on test
results of the analysis and also compare results from all three methods and how they match.
The research was carried out with varied building material samples. Tests were based on reports
published at Asumisterveysopas (2008) and Indoor Air Seminar reports in 1999 and 2005. All
together there were 16 different building material samples. The samples were grown on 2 % malt
extract agar, 18-dichloran-glyserol agar and tryptone-glucose-yeast agar. Malt extract agar and 18-
dichloran-glyserol agar were suitable for the growth of fungi and tryptone-glucose-yeast agar was
suitable for bacteria. Direct microscopic observation was made from native sample and colorized
sample by tape preparation. Fungi were incubated at 25 °C for 7 days and bacteria for 7 + 7 days.
After incubation colonies were calculated and identified.
The result of this study indicates that two of three methods will make microbes in building
material samples grow. As for direct microscopic observation there was basically no growth even
though the samples were taken clearly damaged structure. Other two methods gave same kind of
test results. The results were affected by fact that samples were old and there was no reference
material to compare results.
Tutkimus toteutettiin talven ja kevään 2010 aikana analysoimalla eri rakennusmateriaalinäytteitä Asumisterveysoppaan ohjeiden ja Sisäilmastoseminaareissa vuosina 1999 ja 2005 julkaistujen raporttien mukaan. Rakennusmateriaalinäytteitä oli 16 kappaletta. Sieni-itiöt kasvatettiin 2 % mallasuute- ja dikloran-glyseroli-18-alustoilla. Bakteerit kasvatettiin tryptoni-hiivauute-glukoosi-alustalla. Suora mikroskopointi tehtiin näytteestä otetun teippipreparaatin avulla värjäämättömänä sekä värjättynä. Viljelyn jälkeen sienimaljoja inkuboitiin lämpökaapissa (25 °C) 7 vuorokautta ja bakteerimaljoja 7 + 7 vuorokautta. Inkuboinnin jälkeen maljoille kasvaneet pesäkkeet laskettiin ja tunnistettiin. Sieni-itiömaljoilta laskettiin erikseen homepesäkkeet ja hiivapesäkkeet, bakteerimaljoilta laskettiin sädesienet ja muut bakteerit erikseen.
Tulosten mukaan valituilla viljelymenetelmillä saadaan materiaalinäytteen mikrobisto kasvamaan. Suora mikroskopointi ei tuottanut mitään tulosta, vaikka näytteistä osa oli selvästi vaurioituneesta rakenteesta otettuja. Tuloksista pystyi päättelemään, että sekä suoraviljely- että laimennosviljelytekniikalla saadaan samansuuntaisia tuloksia. Tuloksiin vaikutti merkittävästi se, että analysoidut näytteet olivat vanhoja, ja vertailumateriaali puuttui.
The thesis was carried out at Jyväskylä University of Applied Sciences in winter and spring 2010.
The main aim was to validate a method consisting three parts for verifying fungi and bacterial
microbe growth in building material samples. The methods were direct microscopic observation,
direct culture method and dilution method for the culture. Validation was made to find out how
different techniques, solutions, agar bases and persons executing these tests have an affect on test
results of the analysis and also compare results from all three methods and how they match.
The research was carried out with varied building material samples. Tests were based on reports
published at Asumisterveysopas (2008) and Indoor Air Seminar reports in 1999 and 2005. All
together there were 16 different building material samples. The samples were grown on 2 % malt
extract agar, 18-dichloran-glyserol agar and tryptone-glucose-yeast agar. Malt extract agar and 18-
dichloran-glyserol agar were suitable for the growth of fungi and tryptone-glucose-yeast agar was
suitable for bacteria. Direct microscopic observation was made from native sample and colorized
sample by tape preparation. Fungi were incubated at 25 °C for 7 days and bacteria for 7 + 7 days.
After incubation colonies were calculated and identified.
The result of this study indicates that two of three methods will make microbes in building
material samples grow. As for direct microscopic observation there was basically no growth even
though the samples were taken clearly damaged structure. Other two methods gave same kind of
test results. The results were affected by fact that samples were old and there was no reference
material to compare results.