Eri vasta-aineiden ilmeneminen entsyymikäsitellyillä soluilla LISS/Coombs-korteilla

Abstract

Ennen jokaista verensiirtoa täytyy tehdä useita verensiirtoserologisia tutkimuksia, jotta voidaan varmistua siitä, onko verivalmiste turvallista siirtää potilaalle. Ensimmäisenä määritetään potilaan veriryhmä ja tämän jälkeen ennen verensiirtoa tehdään veriryhmän tarkistus ja veriryhmävasta-aineiden seulonta. ”Type & Screen”-käytäntöä noudattavissa verikeskuksissa, seulonnan ollessa negatiivinen, verensiirrossa ei tarvitse huomioida kuin ABO-veriryhmä. Jos seulonta on positiivinen, täytyy jatkotutkimuksilla tunnistaa mikä vasta-aine saa positiivisen reaktion aikaan. Opinnäytetyön tarkoituksena oli selvittää, saataisiinko eri vasta-aineita paremmin esille entsyymikäsitellyillä testisoluilla LISS/Coombs-geelikortteja käyttäen. Normaalisti vasta-aineiden ilmenemistä entsyymikäsitellyillä soluilla tutkitaan NaCl/Enzyme-korteilla eikä LISS/Coombs-korteilla.

Tutkimuksen näyteaineisto koottiin Fimlab Laboratoriot Oy:n potilasnäytteistä ja tutkimukseen otettiin mukaan vasta-aineseulonta-negatiivisia ja -positiivisia näytteitä. Työn tavoitteena oli tarjota toimeksiantajalle Fimlab Laboratoriot Oy:lle tietoa, olisiko kyseisestä menetelmästä hyötyä vasta-aineiden tunnistuksessa. Vasta-aineseulonta-positiivisista näytteistä analysoitiin LISS/Coombs-korttipaneelit, NaCl/Enzyme-entsyymikorttipaneelit ja LISS/Coombs-entsyymikorttipaneelit, ja saadut reaktiot koottiin taulukoihin. Näiden eri korttien reaktiovoimakkuuksia vertailtiin toisiinsa. Erityisesti kiinnostuksen kohteena oli tutkia anti-Jka:n ilmenemistä, mutta vasta-aineen harvinaisuuden vuoksi sitä ei saatu tutkimukseen mukaan.

Reaktiovoimakkuuksia vertailemalla voidaan tehdä johtopäätös, että suurimmassa osassa näytteistä vasta-aineiden ilmeneminen entsyymikäsitellyillä soluilla LISS/Coombs-korteilla oli reaktiovoimakkuuksiltaan voimakkaampia tai reaktiot olivat yhtä voimakkaita kuin entsyymimenetelmällä NaCl/Enzyme-korteilla. Tutkittavalla menetelmällä saatiin myös reaktioita sellaisilla testisoluilla, joilla ei muilla menetelmillä tapahtunut reaktiota. Näytemäärä oli kuitenkin pieni, joten tutkimustulosten varmistamiseksi tarvitaan jatkotutkimuksia. Jatkotutkimukset tulisi toteuttaa isommalla näytemäärällä, jotta tuloksista voitaisiin paremmin arvioida kyseisen menetelmän hyötyjä. Jatkotutkimuksia suositellaan erityisesti Rh- ja Kell-veriryhmäjärjestelmien vasta-aineille. Rh- ja Kell-veriryhmäjärjestelmien vasta-aineet ilmenivät tutkimuksessa paremmin tutkittavalla menetelmällä ja jos vastaavia tuloksia saataisiin enemmän, voisi kyseistä menetelmää mahdollisesti käyttää vasta-aineiden tunnistuksen apuna.

The aim of this study was to clarify whether different blood group antibodies could be better identified with enzyme-treated cells and LISS/Coombs-gel cards. In practice antibodies are identified with NaCl/Enzyme-cards not LISS/Coombs-cards when using enzyme-treated cells. All the data used in this study were collected and analyzed in Fimlab laboratories blood bank. The purpose was to gather more information for Fimlab laboratories if the method used in this study could be used in practice to identify blood group antibodies.

Antibody screening negative and positive samples were collected to the study. Antibody screening positive samples were analyzed with three different methods: LISS/Coombs-cards, NaCl/Enzyme-cards with enzyme-treated cells and LISS/Coombs-cards with enzyme-treated cells. The results from three different methods were combined into Excel-table and they were compared. Antibody anti-Jka was the main subject of interest in this study but due to its rarity it could not be included.

The results show that the majority of the antibody identification reactions were more sensitively or equally shown with LISS/Coombs-cards than NaCl/Enzyme-cards when using enzyme-treated cells. Reactions were also shown with test cells which had no reactions with other methods than LISS/Coombs-cards and enzyme-treated cells. Rh- and Kell blood group antibodies were noticed to have stronger reactions with LISS/Coombs-cards and enzyme-treated cells than other methods. The small amount of data used in this study requires further studies with larger data to prove whether this method is beneficial and can be used in practice.