ALPPIRUUSUJEN SIEMENTEN JA SIITEPÖLYN KRYOSÄILYTYS

Abstract

Opinnäytetyön tavoitteena oli kehittää nestetyppipakastusmenetelmä suomalaisten alppiruusujen siementen ja siitepölyn pitkäaikaissäilytykseen. Työn tilaaja oli Maa‐ ja elintarviketalouden tutkimuskeskus (MTT), Laukaan toimipaikka. MTT:ssä nestetyppipakastusta ei ollut aikaisemmin kokeiltu siemenille eikä siitepölylle. Taustatieto löydettiin ulkomaisista julkaisuista. Materiaali kerättiin maalis‐huhtikuun 2011 aikana Laukaan kokoelmista. Siemenet kerättiin kenttäkokoelmista ja siitepöly kasvihuoneista. Yhteensä tutkimuksessa käytettiin 20:tä eri alppiruusulajiketta ja‐jalostetta.

Siemenille löydettiin pintasterilointiin sopivat liuokset ja välineet, steriilit kasvualustat ja kryopakastukseen sopivat välineet. Siementen kosteuspitoisuus huoneilmakuivatuksen jälkeen oli 6—8 %. Aineistolle sovellettiin kuivuutta sietävien (orthodox) siementen kryomenetelmiä. Kokeilujen perusteella todettiin, että nopea pakastus ja nopea sulatus ovat toimivia menetelmiä näille siemenille. Tutkimuksen tulos oli, että kryopakastettujen siementen itäminen ei merkittävästi eronnut kontrollisiementen itämisestä. Tulos perustuu 1500 siemenen testaamiseen, siemenistä puolet sai nestetyppikäsittelyn ja puolet oli kontrolleja.

Siitepölylle löydettiin kasvatusliuos ja ‐astia, jolla siitepöly saatiin itämään. Siitepölyhiukkasten erotteluun ponsista löytyi toimiva menetelmä. Toimiviksi menetelmiksi todettiin siitepölyn kuivattaminen huoneilmassa, nopea pakastus ja nopea sulatus. Tutkimuksen tulos oli, että nestetyppipakastus ei heikennä suomalaisten alppiruusujen siitepölyn itävyyttä. Tulos perustuu usean henkilön silmämääräiseen arviointiin koskien 13:a lajiketta ja jalostetta.

Kehitetyt menetelmät sekä siemenille että siitepölylle voidaan ottaa käyttöön sellaisenaan. Siementen osalta menetelmän toistettavuutta voi parantaa.

The goal of this research was to develop a cryopreservation method for Finnish rhododendron seeds and pollen. Cryopreservation is one method for the long‐term conservation of plant genetic resources. The study was carried out for Agrifood Research Finland (MTT) at Laukaa. Cryopreservation for seeds or for pollen had not been studied before in MTT. Background information was found from foreign publications. The material was collected during March and April in 2011. The seeds were collected from the field collections at MTT Laukaa and the pollen from the greenhouses. In total there were 20 different rhododendron cultivars and selected plants studied in this research.

For seeds it was possible to find functional mediums and tools for disinfection, sterile germination mediums and workable tools for cryofreezing. After air‐drying the water content of the seeds was 6—8 %. Cryomethods of orthodox seeds were applied for the studied material. Based on the experiments it was discovered that rapid freezing and rapid thawing are workable methods for these seeds. The result of the study was that the germination of cryopreserved seeds was not significantly different from germination of the fresh seeds. The result is based on testing 1500 seeds of which half were plunged into liquid nitrogen and the other half were control seeds.

For pollen a suitable germination medium and dish were found. A workable method was found to separate pollen grains from anthers. Dehydration by air‐drying, rapid freezing and rapid thawing were discovered as workable methods for pollen. The finding of the study was that cryopreservation does not decrease the germination of Finnish rhododendron pollen. The result is based on a visual estimate of several persons concerning 13 cultivars and selected clones.

The methods developed can be introduced as such for both seeds and pollen. The repeatability of the method for seeds can be improved.