Tärkkelysmäärityksen validointi

Abstract

Opinnäytetyö tehtiin KVVY Tutkimus Oy:n elintarvikekemian osastolle Porin toimipisteeseen. Laboratoriossa käytössä ollut tärkkelysmäärityksen menetelmä koettiin aikaavieväksi ja vaivalloiseksi, minkä vuoksi menetelmä haluttiin vaihtaa nopeampaan ja vähemmän työtä vaativaan menetelmään. Opinnäytetyön tavoitteena oli ottaa käyttöön ja validoida uusi tärkkelysmäärityksen menetelmä. Tarkoituksena oli käyttää kaupallista Megazyme Total Starch Assay Kit (AA/AMG) -menetelmäpakkausta ja mitata useasta eri elintarvikematriisista tärkkelyspitoisuus spektrofotometrisesti. Menetelmää tarvitaan erityisesti erään asiakkaan näytteiden määritykseen, minkä vuoksi validoinnissa keskityttiin perunatärkkelys-, perunajauho-, härkäpaputärkkelys- ja härkäpapuproteiininäytteisiin.

Validoinnissa saatiin määritettyä asiakkaan näytteet toistettavuudeltaan ja oikeellisuudeltaan hyväksyttävästi. Akkreditoituun, GBA:n laboratorion suorittamaan määritykseen, verrattuna ainoastaan tärkkelyspitoisuudeltaan hyvin pienen härkäpapuproteiinin virheprosentti oli liian suuri. GBA:n laboratoriossa tutkitutettiin myös koostumukseltaan tuntemattomia näytteitä, mutta näistä näytteistä validoinnin yhteydessä saadut tulokset eivät olleet yhteneväisiä GBA:n tulosten kanssa. Validoinnissa saadut huomattavasti korkeammat tulokset voivat johtua näytteiden mahdollisesti sisältämistä sokereista tai näytteisiin säilytyksen aikana kertyneestä kosteudesta. Menetelmän ulkoista laadunarviointia varten mitattiin lisäksi LGC:n järjestämän pätevyyskoekierroksen (Qmas Round: MT295 MT4832) interkalibrointinäyte, josta saatiin hyväksyttävä tulos.

Validoitua menetelmää voidaan käyttää KVVY Tutkimus Oy:n elintarvikelaboratoriossa tärkkelyspitoisuuden määritykseen. Jatkossa menetelmää voitaisiin kehittää ottamalla käyttöön kylmäkuivaus näytteiden esikäsittelyyn paljon kosteutta sisältävien elintarvikkeiden kohdalla ja laajentaa validointi kattamaan myös tärkkelyspitoisuus kuiva-ainetta kohti sekä etanolipesu sokeria sisältäville näytteille. Asiakkaan toiveena olisi lisätä kokonaistärkkelyksen määrityksen rinnalle vielä resistentin tärkkelyksen määritys.

The aim of this thesis was to implement and validate a new method for the determination of starch to replace the previous method at the food chemistry department of KVVY Tutkimus Oy. The previous method was considered time-consuming and laborious, and the new method was intended to shorten the analysis time as well as reduce the amount of active work required. The new method is based on a kit provided by Megazyme.

The purpose of this work was to use Total Starch Assay Kit (AA/AMG) by Megazyme to measure spectrophotometrically the starch content in various food products. The method will be mostly required for a specific customer’s samples, which is why the main focus was on four sample matrices including potato flour, potato protein, fava bean flour and fava bean protein.

The results of eight different samples were compared with a laboratory performing accredited measurement of total starch content. The comparison showed that the customer’s samples had been succesfully determined during the validation process, except for fava bean protein. However, four samples of unknown composition yielded significantly higher concentrations compared with the other laboratory. One explanation for the too high measurement results could be possible sugar components in the samples. In addition to sending samples to another laboratory, an LGC AXIO Proficiency Testing sample (Qmas Round MT295 MT4832) was analysed. The result of the intercalibration sample was on an acceptable level according to the performance assessment score set by LGC.

The validated method can be used for the determination of starch at KVVY Tutkimus Oy. In the future, the method could be validated for dry-freezing of samples that have high moisture contents and for starch determination per dry weight. Furthermore, ethanol washing could be introduced to the pretreatment process to ensure that no interfering sugar compounds are left in the sample. The possibility for determination of resistant starch will also be investigated.