Punktionesteiden säilytysajan vaikutus puna- ja valkosolujen analyysikelpoisuuteen

Abstract

Verisolujen morfologinen arviointi on tärkeä osa kehon nesteiden arviointia. Punktionesteitä esiintyy kehon eri onteloissa normaalisti vähän. Ontelonesteiden kertyminen on aina poikkeavaa, ja sen selvittely vaatii erilaisia tutkimuksia. Nämä tutkimukset tarjoavat kliinisesti hyödyllistä tietoa muun muassa erilaisista tulehdustiloista. Kehon nesteiden solulaskennassa voidaan käyttää hematologista analysaattoria, kuten Sysmex XN-analysaattoria, joka laskee kehon nesteiden solut automatisoidusti. Sysmex XN -analysaattorilla voidaan analysoida tutkittavan punktionestenäytteen puna- ja valkosolujen lukumääriä punktionestenäytteelle määritettyjen raja-arvojen sisällä. Puna- ja valkosolujen lukumäärien lisäksi Sysmex XN -analysaattori suorittaa valkosolujen erittelylaskennan, jossa saadaan selville valkosolujen suhteelliset osuudet. Tässä tutkimuksessa käytettyjä punktionestenäytteitä ovat aivo-selkäydinneste eli likvori, askites, nivelneste ja pleuraneste.

Tämän opinnäytetyön tarkoituksena oli tutkia, missä ajassa ja lämpötilassa likvori, askites, nivelneste ja pleuraneste säilyvät ilman merkittäviä puna- ja valkosolujen lukumäärien muutoksia näytteessä. Tämän opinnäytetyön tavoitteena oli selvittää, onko näille punktionestenäytteille mahdollista sallia nykyistä laajemmat säilytysajat. Tieto punktionestenäytteiden säilytysajoista ja säilyvyydestä varmistaa punktionestenäytteiden analyysikelpoisuuden ja edesauttaa potilaan täsmällisen ja luotettavan diagnoosin tekemistä. Pidemmät säilytysajat mahdollistavat laboratorion henkilökunnan siirtymisen muihin kiireellisyyttä vaativiin työtehtäviin. Tämä opinnäytetyö toteutettiin toimeksiantona Turun yliopistollisen keskussairaalan hematologian laboratoriolle, jossa likvorinäytteet analysoidaan yhden tunnin sisällä, ja askites-, nivel- ja pleuranestenäytteet kahden tunnin sisällä näytteenotosta.

Tutkimuksen käytännön osuudessa punktionestenäytteiden puna- ja valkosolujen lukumääriä analysoitiin Sysmex XN -analysaattorilla. Analysointi suoritettiin eri aikapisteissä näytteen riittävyyden ja analysaattorin käytettävyyden mukaan korkeintaan kuuden tunnin ajan. Mahdollisuuksien mukaan punktionestenäytteistä otettiin vertailuparit ja niitä säilytettiin huoneenlämpötilassa ja jääkaappilämpötilassa. Punktionestenäytteen solumäärien muutoksia tarkkailtiin ja tulokset kirjattiin Excel-taulukkoon sekä taulukoitiin viivakaavioksi. Tulosten tarkastelun perusteella solumäärät nivel- ja pleuranestenäytteissä eivät vaihdelleet merkittävästi kuuden tunnin aikana. Likvorinestenäytteiden säilymisaika oli korkeintaan kolme tuntia jääkaappilämpötilassa. Askitesnestenäytteistä johtopäätöksiä ei ollut mahdollista tehdä pienen näytemateriaalimäärän vuoksi.

Morphological evaluation of blood cells is an important part of the examination of body fluids. Puncture fluids are normally present in small amounts in various cavities of the body. Increased accumulation of fluids in the cavities is always anomalous and requires various tests. These tests provide clinically useful information on, among other things, various infections. A hematology analyzer, such as the Sysmex XN -analyzer, can be used to perform body fluid cell counts automatically. The Sysmex XN -analyzer with the Body Fluid -mode is used to count red and white blood cells in body fluids within the limits specified for them. In addition to red and white blood cell counts, the Sysmex XN -analyzer performs a white blood cell differential count that determines the percentage of each type of white blood cell. Body fluid samples used in this study include cerebrospinal fluid, ascitic fluid, synovial fluid, and pleural fluid.

The purpose of this thesis was to study how the preservation time and temperature effect on cerebrospinal fluid, ascitic fluid, synovial fluid, and pleural fluid without significant changes in red and white blood cell counts in the sample. The objective of this thesis was to examine whether these body fluid samples might have more extended preserving time. Information on the preserving time of body fluid samples ensures the analytical capability of body fluids, and facilitates accurate and reliable diagnosis of the patient. More extended preservation time allows laboratory staff to work with other urgent tasks. This thesis was commissioned by the department of hematology laboratory of Turku University Hospital, where cerebrospinal fluid samples are analyzed within one hour, and ascitic fluid, synovial fluid and pleural fluid samples within two hours of sampling.

The practical part of the thesis was an experimental study in which red and white blood cell counts of body fluid samples were performed at different time points with a Sysmex XN -analyzer according to sample adequacy and availability of the analyzer for up to six hours. Whenever possible, the reference pairs were taken from each body fluid sample and stored at both room temperature and refrigerator temperature. Any changes in cell counts of body fluid samples were considered and the results were recorded in an Excel spreadsheet and tabulated as line charts. As a conclusion of the results, the number of cells in the synovial and pleural fluid samples did not vary significantly over the six hours. Cerebrospinal fluid samples preserved up to three hours at refrigerator temperature. It was not possible to draw conclusions about ascitic fluid samples due to the small number of sample material.