Kolmen pionilajikkeen mikrolisäys

Abstract

Tämän opinnäytetyön tavoitteena oli löytää sopiva sterilointimenetelmä ja aloitusalusta kolmelle pionilajikkeelle: Paeonia hybrida, Paeonia hybrid ´ Coral Sunset` ja Paeonia hybrid ´Many Happy Returns`. Tavoitteena oli aikaansaada viljelmä, jota Lepaan mikrolisäyslaboratorio voi käyttää myöhemmin. Opinnäytetyön tilaajana oli taimitarha Taimimoisio.

Olemassa olevaa suomalaista tietoa pionien mikrolisäyksestä ei ollut. Työssä sovellettiin Lepaan mikrolisäyslaboratoriossa käytettyjä menetelmiä ja ulkomaalaisia tutkimuksia.

Työ aloitettiin maaliskuussa 2012 ja lopetettiin kesäkuussa 2012. Työ suoritettiin Lepaan mikrolisäyslaboratoriossa. Lisäysmateriaali saatiin tilaajalta. Emokasvit hyödettiin lämpimässä kasvun aikaansaamiseksi. Aloitusmateriaalina käytettiin kasvullisia versoja ja juurisilmuja. Versoille päädyttiin kokeilemaan vain yhtä sterilointia. Menetelmässä käytettiin etanolia (70%) ja natriumhypokloriittia. Juurisilmujen steriloinnissa kokeiltiin kolmea eri sterilointia. Sterilointia kokeiltiin ilman alkoholia ja vaihtamalla natriumhypokloriitin vaikutusaikaa. Steriloinnin jälkeen versot ja juurisilmut laitettiin kahdelle eri aloitusalustalle. Viljelyn aikana tehtiin siirrostuksia.

Käytetyt alustat olivat Murashige & Skoogin ravintoalustat, joissa ravinteet olivat puolitettu. Alustoissa käytettiin kasvihormonia bentsyyliaminopuriinia (BAP), jonka pitoisuus oli BAP 1 mg/l ja 2 mg/l. Käytetty sterilointimenetelmä ja molemmat alustat soveltuvat lajikkeiden Paeonia hybrida ja Paeonia hybrid ’Many Happy Returns viljelyyn. Paeonia hybrid ’ Coral Sunset’ lajikkeen soveltuvuudesta ei saatu tietoa, koska kaikki viljelmät saastuivat. Tämän perusteella lajike vaatii uutta sterilointimenetelmän kehittelyä. Tulosten perusteella juurisilmujen sterilointi on haastavaa, koska kaikki viljelmät saastuivat. Siksi juuristoa ei voi suositella aloitusmateriaalina.

The aims of this work were to find a suitable sterilization method and to create a suitable nutrient medium for the initiation of three peony varieties: Paeonia hybrida, Paeonia hybrid ’ Coral Sunset’ and Paeonia hybrid ’Many Happy Returns. The purpose was to obtain a culture which Lepaa micropropagation laboratory can use later. The work was done for the Taimimoisio nursery.

Finnish research on peony micropropagation did not exist. Protocol methods used by the Lepaa micropropagation laboratory and foreign studies were applied in this work.

The experiments begun in March 2012 and were finished in June 2012. The work was carried out in the Lepaa micropropagation laboratory. The propagation material was obtained from the commissioner. The stock plants were forced in warm conditions. Shoots and root buds were used for the propagation. Ethanol (70 %) and sodium hypochlorite were used in the sterilization of shoots. Three different sterilization methods were tested on the root buds. Sterilization was tested without ethanol and changing effectiveness time of sodium hypochlorite. Sterilized shoots and buds were placed on two different media.

Media were based on Murashige’s and Skoog’s medium. In the initiation medium macronutrients of the medium were half-strength and medium contained cytokinin bentzylaminopurine (BAP) 1 or 2 mg/l. The sterilization method used and both media are suitable for Paeonia hybrida and Paeonia hybrid ’Many Happy Returns’. The suitability of Paeonia hybrid ’ Coral Sunset’ for micropropagation is unknown, because all cultures were contaminated. Based on this, the variety requires development of a new sterilization method. Based on the results, the sterilization of root buds proved challenging, because all cultures were contaminated. Therefore using roots is not recommended.