Validering av likvorbilirubinanalys för undersökning av subaraknoidalblödning på Roche Cobas 6000

Abstract

Bilirubin uppkommer i cerebrospinalvätska som en nedbrytningsprodukt av hemoglobin när erytrocyter i det subaraknoidala rummet lyserar. Bestämning av bilirubinkoncentration i cerebrospinalvätska kan påvisa eller utesluta subaraknoidalblödning. För analysering av bilirubin i cerebrospinalvätska räknas den spektrofotometriska metoden som referensmetod. Den är dock tidskrävande och fordrar att provresultaten tolkas av en specialist.

Syftet med detta examensarbete var att validera en metod för mätning av bilirubinkoncentration i cerebrospinalvätska på Roche Cobas 6000. Som undersökningsmetod användes Roches plasma- och serumbilirubinmetod. Undersökningsmetoden modifierades för att den skulle fungera vid bilirubinanalys i cerebrospinalvätska genom sänkning av mätområde och höjning av provvolym. Metodens precision jämfördes med en spektrofotometrisk analysmetod. Även metodens känslighet och påverkan av hemoglobininterferens undersöktes.

En god korrelation fanns mellan Roche Cobas 6000 och den spektrofotometriska metoden. Metoden gav bättre resultat vid högre bilirubinkoncentrationer, men värdena varierade inte signifikant vid lägre koncentrationer. En liten höjning av bilirubinkoncentration syntes vid ett högt hemoglobinvärde när nivåerna av bilirubin var hög. Ingen bestämning av referensintervall eller gränsvärde för undersökningen har gjorts i denna studie.

Bilirubin appears in cerebrospinal fluid as a haemoglobin breakdown product when erythrocytes lyses in the subarachnoid space. The determination of bilirubin concentration in cerebrospinal fluid can prove or exclude subarachnoid haemorrhage. A spectrophotometric examination is considered to be of golden standard regarding the analysis of bilirubin in subarachnoid fluid. It is, however, time-consuming and requires specialist interpretation.

The purpose of this thesis was to validate a method for the measurement of bilirubin concentration in cerebrospinal fluid on Roche Cobas 6000. Roche routine serum and plasma bilirubin assay was used as examination method. The method was modified to suit a bilirubin analysis of cerebrospinal fluid by lowering the measurement range and increasing the sample volume. The precision of the method was compared to a spectrophotometric assay. The sensitivity and influence of haemoglobin interference was also investigated.

A good correlation was found between Roche Cobas 6000 and the spectrophotometric method. The method gave better results at higher bilirubin concentrations, but the values did not vary significantly at lower concentrations. A small increase in bilirubin concentration was seen at a high haemoglobin value when the levels of bilirubin were high. No determination of the reference range or cut-off value for the analysis has been done in this study.