Atropiinin ja obidoksiimin määrittäminen nestekromatografialla : menetelmän kehitys

Abstract

Tämän opinnäytetyön tarkoituksena oli kehittää Puolustusvoimien tutkimuslaitoksen räjähde- ja suojelutekniikkaosastolle kvantitatiivinen analyysimenetelmä pyyhintä- ja nestenäytteiden analysointiin nestekromatografialla, jonka avulla määritettiin tutkimusnäytteistä hermokaasujen vastalääkkeenantolaitteiden sisältämiä lääkeaineita, obidoksiimia ja atropiinia, sekä niiden pitoisuudet. Tavoitteena oli myös saada analyysimenetelmä toimimaan siten, että kumpikin lääkeaine saadaan analysoitua samanaikaisesti.

Kehitetty menetelmä soveltui atropiinin ja obidoksiimin samanaikaiseen määrittämiseen tutkittavista näytteistä. Kalibrointisuorat olivat lineaarisia laajalla pitoisuusalueella, ja menetelmä oli herkkä sekä atropiinille että obidoksiimille. Atropiinin R2 oli 0,9995 ja Obidoksiimin R2 on 0,9999. Samalla menetelmän herkkyys atropiinille oli 38,0 ja obidoksiimille -0,4. Määritysrajaksi saatiin obidoksiimille LOQ=0,26 mg/l ja atropiinille LOQ=0,08 mg/l.

Tarkkuus ja toistettavuus olivat hyvällä tasolla, mutta pienimpien pitoisuuksien kohdalla tarkkuutta ja toistettavuutta olisi hyvä parantaa. Menetelmä sopii hyvin nestenäytteiden analysointiin, mutta sen sopivuutta pyyhintänäytteiden analysointiin tulee kehittää. Haasteina menetelmän kehityksen aikana olivat sopivan kolonnin valinta, stabiilien olosuhteiden ylläpitäminen nestekromatografialaitteistolle ja pienten pitoisuuksien tarkkuusarvojen saavuttaminen hyväksyttävälle tasolle.

Opinnäytetyölle haettiin tutkimuslupaa Maavoimien esikunnalta, sekä tehtiin julkisuustarkastus ennen työn palauttamista oppilaitokselle. Opinnäytetyön tutkimuslupa on asiakirjanumerolla MT6921 ja julkisuustarkastus on asiakirjanumerolla AT31901.

The purpose of this thesis was to develop a quantitative analytical method for the Finnish Defence Research Agency, specifically for the Energetic and CBRN Technology Division. The method involved the analysis of swab and liquid samples using liquid chromatography to determine the concentrations of the pharmaceuticals obidoxime and atropine in research samples. The goal was to establish an analytical method that could simultaneously determine both pharmaceuticals.

The developed method proved suitable for the simultaneous determination of atropine and obidoxime in the research samples. The calibration curves were linear over a wide concentration range, and the method exhibited sensitivity to both atropine and obidoxime. The coefficient of determination (R2) for atropine was 0.9995, and for obidoxime, it was 0.9999. Additionally, the method demonstrated sensitivity values of 38.0 for atropine and -0.4 for obidoxime. The method's limit of quantification (LOQ) was determined to be 0.26 mg/l for obidoxime and 0.08 mg/l for atropine.

The precision and repeatability of the method were at an acceptable level, although improvements in precision and repeatability at lower concentrations would be beneficial. While the method was well-suited for the analysis of liquid samples, its applicability to swab samples needs further development. Challenges encountered during the method development included the selection of an appropriate column, maintaining stable conditions for the liquid chromatography equipment, and achieving acceptable precision values for low concentrations.

For the thesis a research permit was applied from the Army Command and a publicity inspection was conducted before submitting the thesis to the Turku University of Applied Sciences. The research permit and the publicity inspection are with the document numbers MT6921 and AT31901 respectively.