Apoptoosin mittausmenetelmien testaus ja kehittäminen kilpirauhas- ja diabetessairauksien mekanismien tutkimiseksi
Taralainen, Maarit (2025)
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-202505058960
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-202505058960
Tiivistelmä
Opinnäytetyössä tutkittiin haiman beetasolujen ja kilpirauhassolujen endoplasmakalvoston (ER) stressin aiheuttamaa apoptoosia eli ohjelmoitua solukuolemaa. Tutkimus toteutettiin Turun yliopiston Kilpirauhas- ja diabetestutkimusryhmän toimeksiannosta osana laajempaa projektia, jossa tutkitaan kilpirauhassairauksien geneettisiä taustatekijöitä sekä tyypin 1 diabeteksen syntymekanismeja. Malliorganismeina käytettiin kilpirauhassolulinjoja sekä beetasoluja.
Työn tavoitteena oli optimoida apoptoosin mittausmenetelmiä solulinjoissa. Apoptoosia tutkittiin altistamalla solumallit thapsigargiinille, joka käynnistää solukuoleman ER-stressin välityksellä. Soluvasteita analysoitiin IncuCyte-kuvantamisella, Hoechst- ja PI-värjäykseillä sekä Western blot -menetelmällä.
Tulokset osoittivat thapsigargiinikäsittelyn toimivan herkästi ja inhiboivan solujen proliferaatiota todennäköisesti apoptoosin induktion kautta. Tätä havaintoa tukivat myös värjäyksiin perustuvat laskennalliset apoptoosiarviot, vaikka menetelmä vaatii vielä lisäoptimointia. Jatkotutkimuksissa pyritään kehittämään värjäysprotokollaa ja edistämään reaaliaikaiseen soluviljelyseurantaan soveltuvan menetelmän käyttöönottoa apoptoosin mittaamiseksi.
Työn tavoitteena oli optimoida apoptoosin mittausmenetelmiä solulinjoissa. Apoptoosia tutkittiin altistamalla solumallit thapsigargiinille, joka käynnistää solukuoleman ER-stressin välityksellä. Soluvasteita analysoitiin IncuCyte-kuvantamisella, Hoechst- ja PI-värjäykseillä sekä Western blot -menetelmällä.
Tulokset osoittivat thapsigargiinikäsittelyn toimivan herkästi ja inhiboivan solujen proliferaatiota todennäköisesti apoptoosin induktion kautta. Tätä havaintoa tukivat myös värjäyksiin perustuvat laskennalliset apoptoosiarviot, vaikka menetelmä vaatii vielä lisäoptimointia. Jatkotutkimuksissa pyritään kehittämään värjäysprotokollaa ja edistämään reaaliaikaiseen soluviljelyseurantaan soveltuvan menetelmän käyttöönottoa apoptoosin mittaamiseksi.