Hyppää sisältöön
    • Suomeksi
    • På svenska
    • In English
  • Suomi
  • Svenska
  • English
  • Kirjaudu
Hakuohjeet
JavaScript is disabled for your browser. Some features of this site may not work without it.
Näytä viite 
  •   Ammattikorkeakoulut
  • Turun ammattikorkeakoulu
  • Opinnäytetyöt (Avoin kokoelma)
  • Näytä viite
  •   Ammattikorkeakoulut
  • Turun ammattikorkeakoulu
  • Opinnäytetyöt (Avoin kokoelma)
  • Näytä viite

Nisiinin tuoton optimointi T7 Express E.coli -kannassa

Ruuskanen, Anna (2025)

Avaa tiedosto
Ruuskanen_Anna.pdf (2.672Mt)
Lataukset: 


Ruuskanen, Anna
2025
All rights reserved. This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Näytä kaikki kuvailutiedot
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2025062523476
Tiivistelmä
Opinnäytetyö tehtiin Turun ammattikorkeakoulun 3D-CURE-projektille, jonka tavoitteena on kehittää ratkaisuja personoidun lääkehoidon toteutukseen 3Dtulostuksen avulla. Projektia varten tarvittiin pienmolekyylilääkkeitä simuloivaa nisiinipeptidiä, jonka avulla on myöhemmin tarkoitus tutkia pienmolekyylien kapselointia sekä käyttäytymistä 3D-tulostetuissa biomateriaaleissa. Opinnäytetyön tarkoitus oli optimoida fuusionisiinin tuottoprosessi T7 Express E.coli -kannassa. Tavoitteena oli tulosten pohjalta luoda fuusionisiinille toimiva kasvatus- ja tuottoprotokolla. Olosuhteita kartoitettiin ensin pienemmässä mittakaavassa pullokasvatuksilla, joiden pohjalta tehtiin tuottokasvatus bioreaktorissa. Lopputuotteen puhdistuksessa sekä tunnistamisessa hyödynnettiin siihen fuusioitua histidiinihäntää. Nisiiniä ei ole aiemmin tuotettu T7 Express E.coli -kannassa, joten työ tarjosi lisätietoa eri parametrien vaikutuksesta nisiinin tuotolle kyseisessä kannassa. Fuusionisiinin onnistunut tuotto varmistettiin lopuksi SDS-PAGEn ja Western blottauksen avulla. Kehitystyön tuloksena saatiin optimoitua tuottoprosessi solukasvatuksesta lopputuotteen puhdistukseen sekä viimeistelyyn. Työssä nousi esille uusia tutkimus- ja kehityskohteita, kuten eri kasvatusliemien ja pH:n vaikutus lopputuotteeseen. Fuusionisiinin tuotto vaatii vielä lisää tutkimus- ja kehitystyötä, jotta lopputuote saadaan sellaiseen muotoon, että sitä voidaan käyttää 3D-CURE-projektissa.
 
This thesis was commissioned by Turku University of Applied Sciences as part of the project 3D-CURE, which aimed to develop solutions for personalized medicine and drug delivery by using 3D-printing. For the project, a nisin peptide that simulates small molecule drugs was needed, which will later be used to study encapsulation of small molecules and their behavior in 3D-printed biomaterials. The purpose of this study was to optimize the production process of fusion nisin in T7 Express E.coli strain. Based on these results, the aim was to create a functional production protocol for fusion nisin. At first, cultivation conditions were investigated at a smaller scale in shake flasks and then tested in a bioreactor. Histidine tail fused into the end product was utilized in the purification and identification. This study offered new information on the effect of different parameters on the production of nisin in the particular strain T7 Express E.coli where nisin has not been previously produced. SDS-PAGE and Western blot were used to ensure production of fusion nisin. As a result of the experiments, an optimized production process from cultivation to purification and polishing of the end product was achieved. New discoveries were made regarding the effect of culture medium and pH on the end product. In order to fully utilize nisin in the 3D-CURE-project, more research and development is needed for the production process of fusion nisin.
 
Kokoelmat
  • Opinnäytetyöt (Avoin kokoelma)
Ammattikorkeakoulujen opinnäytetyöt ja julkaisut
Yhteydenotto | Tietoa käyttöoikeuksista | Tietosuojailmoitus | Saavutettavuusseloste
 

Selaa kokoelmaa

NimekkeetTekijätJulkaisuajatKoulutusalatAsiasanatUusimmatKokoelmat

Henkilökunnalle

Ammattikorkeakoulujen opinnäytetyöt ja julkaisut
Yhteydenotto | Tietoa käyttöoikeuksista | Tietosuojailmoitus | Saavutettavuusseloste