Mikrobilääkejäämätestin käyttöönotto munuaisnäytteille

Abstract

Opinnäytetyö toteutettiin Atria Suomi Oy:n mikrobiologisessa laboratoriossa Nurmossa. Laboratorion nykyinen menetelmä todennäköisesti poistuu akkreditoinnin pätevyysalueelta muutaman vuoden kuluessa, kun vertailututkimuksien tekeminen loppuu. Tällä hetkellä käytössä olevan kaksoismaljatestin tarvikkeiden saatavuudessa on suuria ongelmia. Uuden Premi®Test-menetelmän myötä mikrobilääkejäämien tutkimista voidaan jatkaa, ja se mahdollistaisi menetelmän pysymisen akkreditoinnin pätevyysalueella. Työn tavoitteena oli aloittaa uuden menetelmän verifiointi sian ja naudan munuaisnäytteillä. Verifiointia on tarkoitus jatkaa myöhemmin lihasnäytteiden osalta, jotta menetelmän soveltuvuutta voidaan laajentaa.

Työn tarkoituksena oli analysoida eri vahvuisilla antibioottiliuoksilla spiikattuja eli kyllästettyjä munuaisnestenäytteitä Premi®Testillä sekä tutkia lämpötilojen ja inkubointiaikojen vaikutusta tulosten oikeellisuuteen. Menetelmä on kvalitatiivinen seulontamenetelmä, jonka todentamiseen tuli määrittää Euroopan komission täytäntöönpanoasetuksen 2021_808 mukaiset suorituskykyarvot.

Verifioinnin kannalta keskeisintä oli määrittää analysoitavien antibioottien havaitsemisrajat. Määritettävät antibiootit pyrittiin valitsemaan niin, että melkein jokaisesta antibioottiryhmästä olisi vähintään yksi ryhmää edustava antibiootti. Tulosten perusteella suurin osa havaitsemisrajoista alitti selvästi antibiooteille asetetut MRL-arvot. Kuitenkin tietyillä antibiooteilla menetelmä ei saavuttanut riittävää herkkyyttä. Häiriönkestävyyttä tarkasteltaessa osoitettiin, että lämpötilan tai inkubointiaikojen muutos ei vaikuta tulosten oikeellisuuteen.

This thesis was carried out in the microbiological laboratory of Atria Finland Oy in Nurmo. The laboratory’s current method will soon be excluded from accreditation due to the discontinuation of supporting reference studies and supply shortages. The introduction of the Premi®Test method enables continued testing for antimicrobial residues and maintains accreditation status. Verification will be continued later with muscle samples to expand the applicability of the method.

The objective was to verify the Premi®Test for porcine and bovine kidney samples. The study involved analysing spiked kidney fluid samples with varying antibiotic concentrations and assessing the effects of temperature and incubation time on test performance. Verification was carried out according to the European Commission Implementing Regulation 2021/808.

The most critical aspect of the verification was determining the detection limits of the antibiotics analysed. Antibiotics were selected to represent each antibiotic group with at least one compound per group. Based on the results, most detection limits were clearly below the MRL values set for the antibiotics. However, for certain antibiotics, the method did not achieve sufficient sensitivity. When assessing robustness, it was demonstrated that variations in temperature or incubation time do not significantly affect the accuracy of the results.