Enterobakteerien laajakirjoisten beetalaktamaasien tunnistaminen

Abstract

ESBL ja AmpC ovat gram negatiivisten bakteerien tuottamia entsyymejä, jotka ovat resistenttejä tiettyjä antibiootteja kohtaan. ESBL- entsyymeitä tuottavien bakteerien yleistyminen sairaaloissa vaikeuttaa antibioottihoitoa sekä johtaa hoitoon liittyvien infektioiden lisääntymiseen. Beeta- laktaamiryhmän antibiooteilla on ollut merkittävä rooli gram negatiivisten sauvabakteerien aiheuttamien infektioiden hoidossa. Resistentin lisääntyminen beetalaktaameja ja erityisesti karbapeneemejä kohtaan on huolestuttava ilmiö, sillä karbapenemaasit hajoittavat kaikkien beetalaktaameiden lisäksi myös karbapeneemejä. Suomessa karbapenemaasia tuottavat kannat ovat vielä toistaiseksi harvinaisia. Etenkin enterobakteerien kohdalla karbapenemaasia tuottavien bakteerien leviäminen Suomeen on tapahtunut ulkomailla sairaalahoitoa saaneiden potilaiden ja ulkomailta tulleiden sairaalasiirtojen välityksellä. Jotta voidaan toimia monirestistenttien bakteerien torjuntaohjeiden mukaisesti, on laboratoriolla oltava käytössään riittävät diagnostiset valmiudet karbapenmaasien, ESBL:n sekä AmpC:n tunnistamiseen.

Tämän opinnäytetyön tarkoituksena on tunnistaa laajakirjoisten beetalaktamaasien aiheuttaja. Lisäksi vertailimme kahden eri valmistajan kiekkomenetelmää karbapenemaasien tunnistamiseen. ESBL & AmpC osoittamiseen käytimme Mast Group ESBL&AmpC Detection Disc Set kiekkopaneelia. Karbapenemaasin osoittamiseen käytimme Mast Group Mastdiscs combi ja CAT-ID, sekä ROSCO Combined disk test kiekkopaneeleita. Kohteenamme oli 48 enterobakteerikantaa, joilla on jokin tunnettu mekanismi tai Vitek-AES epäily tällaisen olemassaolosta. Tämän tutkimuksen perusteella voidaan todeta Mast Group ESBL&AmpC Detection Disc Sets kiekkopaneeli toimivaksi ja se otettiin käyttöön Fimlab Oy Keski-Suomen toimipisteen mikrobiologian laboratoriossa syksyllä 2015.

The extended-spectrum beta-lactamase (ESBL) and AmpC are enzymes produced by gram- negative bacteria that are resistant to certain antibiotics. The increased emergence of the bacteria producing ESBL enzymes in hospitals makes antibiotic treatments difficult and leads to the increase of care-related infections. The antibiotics of the beta-lactamase group have had a significant role in the treatment of infections caused by gram-negative bacilli. The increased resistance to beta-lactamases and especially to car-bapenemases is a worrying phenomenon because, in addition to disintegrating all the beta-lactamases, the carbapenemases also disintegrate carbapenems.

In Finland the carbapenemase-producing strains are still rare. Especially with regard to enterobacteriaceae, the few carbapenamase producing strains that have been found in Finland have been in patients who have received hospital treatment abroad. In order to act according to the prevention guidelines of the multi-resistant bacteria, laboratories must have an adequate diagnostic readiness for the detection of carbapenemases, ESBL and AmpC.

The purpose of this thesis was to detect the cause of extended-spectrum beta-lactamases. In addition, the thesis focused on evaluating two disc detection procedures of two different manufacturers for the detection of carbapenemases. For the ESBL and AmpC detection the test set used in this thesis was the Mast Group ESBL & AmpC Detection disc panel. For carbapenemase detection the Mastdiscs combi and the CAT-ID test from the Mast Group were used as well as the Combined Disk Test Kit from ROSCO. The tests were run for 48 different bacterial strains that already had an extended-spectrum beta- lactamase mechanism or suspicion of its presence. Based on this study, it can be stated that the ESBL & AmpC Detection Disc Sets from the Mast Group were proven valid. For this reason, they were introduced at the Fimlab microbiology laboratory in Jyväskylä in the autumn of 2015.