Kohdeproteiinin puhdistaminen vasta-aineiden tuotantoa varten ja IEMA-testin optimointi liittyen endometrioosin diagnostiikkaan
Rautiainen, Maarit; Toivonen, Heli (2016)
Rautiainen, Maarit
Toivonen, Heli
Metropolia Ammattikorkeakoulu
2016
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-201604265091
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-201604265091
Tiivistelmä
Endometrioosi on sairaus, jossa kohdun limakalvon kaltaista kudosta esiintyy kohdun ulkopuolella. Endometrioosin nykydiagnostiikka on haasteellista, sillä siihen ei ole vielä spesifistä tutkimusmenetelmää ja samankaltaisia oireita tavataan myös muissa sairauksissa. Endometrioosia esiintyy jopa 10 %:lla hedelmällisessä iässä olevilla naisilla ja tutkimusten mukaan jopa 50 %:lla lapsettomuuspotilaista. Endometrioosiin ei ole parantavaa hoitoa ja se vaikuttaa naisen hedelmällisyyteen sekä heikentää potilaan terveyteen liittyvää elämänlaatua.
Opinnäytetyö oli osa Medix Biochemican kumppanuus-diagnostiikkaprojektia, joka tähtää endometrioosin uudenlaiseen diagnostiikkaan ja lääkehoidon kehittämiseen yhteistyökumppaneiden kanssa. Opinnäytetyön tarkoituksena oli puhdistaa kohdeproteiini-2:ta sekä optimoida diagnostista IEMA-testiä kohdeproteiini-1:lle.
Tavoitteina oli puhdistaa kohdeproteiini-2 niin, että sitä voidaan tulevaisuudessa käyttää sille spesifisten vasta-aineiden kehitykseen. Toisena tavoitteena oli löytää diagnostiselle IEMA-testille sopivin näytemateriaali ja laimennossuhde. Tavoitteena oli myös saada selville lääkeaineen vaikutus testin toimintaan eli sitoutuuko proteiini-1 kuoppalevyn pohjalla olevaan vasta-aineeseen lääkeaineen läsnäolosta huolimatta ja pystyykö tällöin myös HRP-leimattu vasta-aine sitoutumaan.
Tulokset vahvistivat kohteena olevan proteiini-2:n puhdistuksen olevan haasteellista. Varmaa tietoa puhtaan proteiinin määrästä eikä sen puhtaudesta saatu. IEMA-testin optimoinnissa saatiin selville, että paras laimennossuhde oli 1:8 ja paras näytemateriaali seerumi. Testin optimoinnin toisessa työssä huomattiin, että endometrioosin hoitoon kehitetty lääkeaine ei vaikuta IEMA-testin toimintaan.
Opinnäytetyö oli osa Medix Biochemican kumppanuus-diagnostiikkaprojektia, joka tähtää endometrioosin uudenlaiseen diagnostiikkaan ja lääkehoidon kehittämiseen yhteistyökumppaneiden kanssa. Opinnäytetyön tarkoituksena oli puhdistaa kohdeproteiini-2:ta sekä optimoida diagnostista IEMA-testiä kohdeproteiini-1:lle.
Tavoitteina oli puhdistaa kohdeproteiini-2 niin, että sitä voidaan tulevaisuudessa käyttää sille spesifisten vasta-aineiden kehitykseen. Toisena tavoitteena oli löytää diagnostiselle IEMA-testille sopivin näytemateriaali ja laimennossuhde. Tavoitteena oli myös saada selville lääkeaineen vaikutus testin toimintaan eli sitoutuuko proteiini-1 kuoppalevyn pohjalla olevaan vasta-aineeseen lääkeaineen läsnäolosta huolimatta ja pystyykö tällöin myös HRP-leimattu vasta-aine sitoutumaan.
Tulokset vahvistivat kohteena olevan proteiini-2:n puhdistuksen olevan haasteellista. Varmaa tietoa puhtaan proteiinin määrästä eikä sen puhtaudesta saatu. IEMA-testin optimoinnissa saatiin selville, että paras laimennossuhde oli 1:8 ja paras näytemateriaali seerumi. Testin optimoinnin toisessa työssä huomattiin, että endometrioosin hoitoon kehitetty lääkeaine ei vaikuta IEMA-testin toimintaan.