Nisäkässolujen kasvatus bioreaktorissa

Abstract

Työ tehtiin Oulun yliopistolle Biokemian ja molekyylilääketieteen tiedekunnalle. Opinnäytetyön aiheena oli nisäkässolujen kasvatus bioreaktorissa. Työn tavoitteena oli ottaa käyttöön eläinsolujen kasvatukseen tarkoitettu bioreaktori. Työhön kuului CHO-solujen ja HeLa-solujen ylläpito ja jakaminen sekä parametrien määritys nisäkässolukasvatuksille bioreaktorissa.

Työ aloitettiin tutustumalla bioreaktorin toimintaan. Bioreaktorille tehtiin testiajot ennen solukasvatusten aloittamista. Olennainen osa työtä oli myös eläinsolujen käsittelyn oppiminen, soluviljely ja eläinsolujen ylläpito. Työssä tehtiin yksi bioreaktorikasvatus CHO-soluille ja yksi kasvatus HeLa-soluille.

CHO-solujen kasvatus bioreaktorilla ei tässä työssä onnistunut. Onnistuneita tuloksia ei saatu muun muassa kontaminoitumisen vuoksi. HeLa-soluille tehtiin 10 vuorokauden kasvatus, jonka aikana osa soluista kerättiin pois bioreaktorista ja säilöttiin. Kasvatus HeLa-soluilla lähti hyvin käyntiin, mutta loppujen lopuksi prosessi jouduttiin pysäyttämään hiivasolukontaminaation vuoksi.

Subject of this thesis was cultivation of mammalian cells in bioreactor. The aim of the thesis was commissioning of the bioreactor, which was intended for high density animal cell culturing. Part of this thesis was maintenance and propagation of CHO- and HeLa-cells. Determination of parameters for mammalian cell cultivation in bioreactor was also an important part of the job.

Working part was started by familiarizing with operation of the bioreactor. Be-fore starting bioreactor culture with cells, test drives were done. Essential part of this thesis was to learn to handle mammalian cells, their propagation and maintenance as well as to determine how dense cell cultures can be obtained by using the bioreactor. In this thesis one bioreactor culture for CHO-cells and one for HeLa-cells were completed.

In this thesis bioreactor culture with CHO-cells did not succeed. The main reason for this was contamination. Culturing of with HeLa-cells succeeded better. During HeLa-cell cultivation, a portion of HeLa-cells were harvested and frozen. Bioreactor culturing with HeLa-cells started very well, but at the end of 10 day growth period, culture was terminated because of yeast contamination and overgrowth.