Bakteriofagien eristys ja isäntäspesifisyyden määritys faagiterapiaa varten : Esimerkkinä Staphylococcus aureus- ja Acinetobacter baumannii -faagit
Tuomala, Henni (2016)
Avaa tiedosto
Lataukset:
Tuomala, Henni
Metropolia Ammattikorkeakoulu
2016
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2016112517423
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2016112517423
Tiivistelmä
Opinnäytetyössä tutkittiin bakteriofagien mahdollista käyttöä faagiterapiatarkoitukseen. Faa-giterapia on mikrobilääkkeiden rinnalle kehitteillä oleva hoitomuoto, joka perustuu bakteerei-ta infektoivien virusten kykyyn tappaa isäntäbakteeria. Bakteriofagien avulla voidaan elimi-noida bakteeri sitä kantavan eliön elimistöstä ja täten parantaa infektio. Tutkimus on ajan-kohtainen, sillä mikrobilääkkeiden teho hiipuu bakteerien kehittäessä resistenssimekanis-meja, joilla ne voivat puolustautua näiden lääkkeiden tappavaa vaikutusta vastaan. Antibi-oottiresistentit ja ihmisille patogeeniset bakteerit lisäävät bakteeri-infektioiden vaarallisuutta. Tämän vuoksi antibioottiresistentit bakteerit ovat yksi ihmiskunnan terveyttä eniten uhkaava tekijä.
Opinnäytetyön tarkoituksena oli etsiä neljästä sairaalasta kerätystä viemärivesinäytteestä uusia bakteriofageja, jotka infektoivat Acinetobacter baumannii -kantoja,. Toinen osa opin-näytetyötä oli tehdä sioista eristetyille MRSA-kannoille herkkyysmääritykset fRu-Sau02-faagilla. Työssä tutkittiin myös infektoiko kyseinen faagi sioista eristettyjä MRSA-kantoja (MRSA=metisilliini-resistentti Staphylococcus aureus) samalla tapaa kuin se infektoi ihmi-sistä eristettyjä MRSA-kantoja. Tarkoituksena oli myös seuloa fRu-Sau02-faaginäytteen joukosta laajemman isäntäkirjon omaavia bakteriofageja. Projekti tehtiin Helsingin yliopiston Tutkimusohjelmayksikön, Immunobiologian tutkimusohjelmassa, ryhmässä joka tutkii faagi-terapiaa. Tavoitteena oli selvittää voidaanko fRu-Sau02-faagia hyödyntää hoidettaessa si-oista ihmisiin tarttuneita ja infektion aiheuttaneita MRSA-kantoja. Työssä yritettiin myös löy-tää lisää faageja, joilla voidaan hoitaa A. baumannii -bakteerin aiheuttamia infektioita.
Lopputuloksena voidaan todeta, että uusia A. baumannii -kantoja infektoivia bakteriofageja ei löytynyt sairaaloista kerätyistä viemärivesinäytteistä. fRu-Sau02-faagi puolestaan infektoi sioilta eristetyistä MRSA-kannoista 30 %, mikä on suhteellisen hyvä infektioprosentti, mutta rajoittaa sen käyttöä faagiterapiatarkoituksessa. Seulonnan tuloksena voitiin havaita näyt-teessä olevan virusta, joka infektoi yhtä sioilta eristettyä MRSA-kantaa, joka alkuperäisellä fRu-Sau02-näytteellä ei infektoitunut. Saadun viruksen heikon elinkyvyn vuoksi ei voitu määrittää oliko kyseessä mutaatio alkuperäisestä faagista vai jokin muu virus, joka on läh-tenyt kasvamaan seulonnan seurauksena. Täten se ei ole kiinnostava faagiterapian kannal-ta.
Opinnäytetyön tarkoituksena oli etsiä neljästä sairaalasta kerätystä viemärivesinäytteestä uusia bakteriofageja, jotka infektoivat Acinetobacter baumannii -kantoja,. Toinen osa opin-näytetyötä oli tehdä sioista eristetyille MRSA-kannoille herkkyysmääritykset fRu-Sau02-faagilla. Työssä tutkittiin myös infektoiko kyseinen faagi sioista eristettyjä MRSA-kantoja (MRSA=metisilliini-resistentti Staphylococcus aureus) samalla tapaa kuin se infektoi ihmi-sistä eristettyjä MRSA-kantoja. Tarkoituksena oli myös seuloa fRu-Sau02-faaginäytteen joukosta laajemman isäntäkirjon omaavia bakteriofageja. Projekti tehtiin Helsingin yliopiston Tutkimusohjelmayksikön, Immunobiologian tutkimusohjelmassa, ryhmässä joka tutkii faagi-terapiaa. Tavoitteena oli selvittää voidaanko fRu-Sau02-faagia hyödyntää hoidettaessa si-oista ihmisiin tarttuneita ja infektion aiheuttaneita MRSA-kantoja. Työssä yritettiin myös löy-tää lisää faageja, joilla voidaan hoitaa A. baumannii -bakteerin aiheuttamia infektioita.
Lopputuloksena voidaan todeta, että uusia A. baumannii -kantoja infektoivia bakteriofageja ei löytynyt sairaaloista kerätyistä viemärivesinäytteistä. fRu-Sau02-faagi puolestaan infektoi sioilta eristetyistä MRSA-kannoista 30 %, mikä on suhteellisen hyvä infektioprosentti, mutta rajoittaa sen käyttöä faagiterapiatarkoituksessa. Seulonnan tuloksena voitiin havaita näyt-teessä olevan virusta, joka infektoi yhtä sioilta eristettyä MRSA-kantaa, joka alkuperäisellä fRu-Sau02-näytteellä ei infektoitunut. Saadun viruksen heikon elinkyvyn vuoksi ei voitu määrittää oliko kyseessä mutaatio alkuperäisestä faagista vai jokin muu virus, joka on läh-tenyt kasvamaan seulonnan seurauksena. Täten se ei ole kiinnostava faagiterapian kannal-ta.