Säilytyksen vaikutus verinäytteiden analyysituloksiin kliinisessä kemiassa

Abstract

Opinnäytetyössä tutkittiin säilytyksen vaikutusta verinäytteiden analyysituloksiin. Työhön valikoitui mukaan kuusi kliinisen kemian tutkimusta (ALAT, CRP, GT, PROT, K ja Na), jotka valittiin yhdessä toimeksiantajan, Helsingin Biopankin kanssa. Verinäytteet otettiin litium-hepariiniputkiin, ja niitä säilytettiin kokoverenä jääkaappilämpötilassa tutkimukseen valikoitujen aikapisteiden määrittelemän ajan. Aikapisteitä oli yhteensä viisi (1,3,8,24 ja 76,5 h näytteenotosta), joista ensimmäinen aikapiste toimi 0-näytteenä.

Tutkimusaineisto koostui Metropolia ammattikorkeakoulun bioanalyytikko-opiskelijoista otetuista verinäytteistä. Työhön osallistui 14 vapaaehtoista näytteenantajaa.

Näytteiden tuloksia käsiteltiin analyysikohtaisesti. Analyysituloksista laskettiin aikapisteittäin keskiarvot. Aikapisteiden tuloksia verrattiin toisiinsa hyödyntäen varianssianalyysia. Yksittäisten aikapisteiden tulosten vertailussa käytettiin t-testiä. Aiempien tutkimustulosten perusteella asetettiin hypoteesit, joiden perusteella tuloksia arvioitiin. Tulosten luotettavuutta arvioitiin lisäksi vertaamalla tuloksia HUSLABin viitearvoihin.

Kaikissa analyysituloksissa tapahtui pitoisuuden muutoksia säilytysajan pidetessä, mutta muutos oli tilastollisesti merkitsevää kolmen analyytin kohdalla. Viimeisen aikapisteen kaliumarvot olivat moninkertaiset ensimmäisen aikapisteen arvoihin verrattuna. Natriumarvojen muutos oli kaliumia maltillisempaa, ja muutos oli tilastollisesti merkitsevää vain kahden viimeisen aikapisteen kohdalla. ALAT-arvoissa muutos oli merkitsevää kahdessa aikapisteessä (8 ja 76,5 h näytteenotosta).

Tässä opinnäytetyössä keskityttiin vain muutamaan näytteeseen ja lyhyeen ajanjaksoon. Opinnäytetyön tuloksia voisi hyödyntää jatkotutkimuksissa laajentamalla tutkimusvalikoimaa ja aikapisteiden määrää. Työhön voisi myös liittää rinnakkaisnäytteet, mikä lisäisi tulosten luotettavuutta. Tutkimusta voi laajentaa muille erikoisaloille tai muihin näytemuotoihin.

Herkimpien analyyttien (K, ALAT) kannalta näytteen pakastus 24 tunnin kuluessa näytteenotosta (Biopankin sääntö), on liian pitkä aika analyyttien säilymiselle analyysikelpoisina, mutta stabiilimmat analyytit (GT, proteiini) kestävät hyvin 24 tuntia, ilman että analyyttien pitoisuudet näytteissä muuttuvat.

The thesis studied the effect of storage on the analysis results of blood samples. Six studies in clinical chemistry (ALT, CRP, GT, protein, K and Na) were selected for the research together with the client, Helsinki Biobank. The blood samples were taken in lithium-heparin test tubes and stored in whole blood in refrigerator temperatures for a duration determined by time points selected for the study. There were in total five time points (1, 3, 8, 24 and 76,5 hours from taking the samples), of which the first one served as a 0-sample.

The study material consisted of blood samples gathered from biomedical laboratory science students from Metropolia UAS. There were 14 voluntary participants.

The results of the samples were processed per analysis. Means were calculated from the results per time point and those means were then compared with each other utilizing the analysis of variance (ANOVA). T-test was the used to compare single time points with the 0-samples. The results were then evaluated based on set hypotheses, which were based on prior studies. The reliability of the results was additionally assessed by comparing them with the reference values used at HUSLAB.

As the duration of storage extended, there were changes in the content of all analysis results, but they were statistically significant in three cases of analytes. The potassium values of the last time point were multiple compared to the first time-point. The change in the sodium values was more moderate, but still statistically significant. The change in ALT values was significant in two time-points (8 and 76,5 hours from taking the samples).

This thesis concentrated on only a few samples and a short time-period. The results could be utilized in further researches by widening the range of tests and adding time points. Parallel samples could also be added to the research, which would enhance its reliability. The research can be expanded to other branches or other forms of samples.

Concerning the most delicate analytes (K, ALT), freezing the sample in 24 hours from taking the sample (rule of Helsinki Biobank), is too long a time for keeping the samples analyzable. The more stable analytes (GT, protein) keep well for 24 hours, without a change in the content of the samples.