TIMP-1-kudosinhibiittorin määritys ELISA-menetelmällä
Yamazaki, Elina (2017)
Yamazaki, Elina
Metropolia Ammattikorkeakoulu
2017
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2017112618173
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2017112618173
Tiivistelmä
Opinnäytetyö suoritettiin Biomedicumissa, suu- ja leukasairauksien yksikössä Clinicumissa, professori Timo Sorsan tutkimusryhmässä, missä tutkimusten pääkohteena ovat humaani-peräiset Matriksin metalloproteinaasit (MMP-proteinaasit). Näistä MMP-proteinaaseista erityisesti MMP-8-proteinaasit on Sorsan tutkimusryhmäryhmä pystynyt osoittamaan muun muassa toimivaksi testimarkkeriksi iensairaudelle. Tutkimusryhmä tekee yhteistyötä niin kotimaisten kuin kansainvälisten tutkimusryhmien kanssa selvittääkseen MMP-proteinaasien yhteyksiä ihmisten eri sairauksiin. Professori Timo Sorsan tutkijaryhmän jäsenet ovat pääosin peruskoulutukseltaan hammaslääkäreitä kuten hän itsekin.
Tämän opinnäytetyön tarkoituksena oli analysoida ELISA-menetelmällä Matriksin metallopro-teinaasi-1 kudosinhibiittorin (TIMP-1-kudosinhibiittorin) pitoisuus 1093:sta eri seeruminäytteestä, joista aiemmin oli jo määritetty MMP-8-proteinaasipitoisuus fluorometriin perustuvalla pitoisuusmääritysmenetelmällä. Näin saatiin aineisto MMP-8/TIMP-1 moolisuhteen määrittämiseksi, minkä numerollisen arvon oletetaan korreloivan potilaan kliiniseen tilaan. Tarkoitus oli siis tuottaa TIMP-1-proteinaasin ja MMP-8-proteinaasin pitoisuusmääritysten avulla tutkimusaineistoa selvitettäväksi, onko kyseessä olevan entsyymin ja sen estäjän seerumipitoisuuksilla merkittävää osuutta tutkimuspotilaiden tautitilassa innoittaen mahdollisiin lisätutkimuksiin tähdäten diagnostisiin tai hoidollisiin tavoitteisiin.
Työssä vertailtiin myös seerumipitoisuuksia eri ELISA-kuoppalevyjen välillä ja standardien vaihtelua kuoppalevyjen välillä laadunvarmistuksen tarkkailemiseksi. Pohdittiin myös ELISA-menetelmässä ilmeneviä haasteita sekä pipetointitekniikkaa.
ELISA-menetelmän todettiin olevan luotettava tapa tutkia suuria näytemääriä.
Tämän opinnäytetyön tarkoituksena oli analysoida ELISA-menetelmällä Matriksin metallopro-teinaasi-1 kudosinhibiittorin (TIMP-1-kudosinhibiittorin) pitoisuus 1093:sta eri seeruminäytteestä, joista aiemmin oli jo määritetty MMP-8-proteinaasipitoisuus fluorometriin perustuvalla pitoisuusmääritysmenetelmällä. Näin saatiin aineisto MMP-8/TIMP-1 moolisuhteen määrittämiseksi, minkä numerollisen arvon oletetaan korreloivan potilaan kliiniseen tilaan. Tarkoitus oli siis tuottaa TIMP-1-proteinaasin ja MMP-8-proteinaasin pitoisuusmääritysten avulla tutkimusaineistoa selvitettäväksi, onko kyseessä olevan entsyymin ja sen estäjän seerumipitoisuuksilla merkittävää osuutta tutkimuspotilaiden tautitilassa innoittaen mahdollisiin lisätutkimuksiin tähdäten diagnostisiin tai hoidollisiin tavoitteisiin.
Työssä vertailtiin myös seerumipitoisuuksia eri ELISA-kuoppalevyjen välillä ja standardien vaihtelua kuoppalevyjen välillä laadunvarmistuksen tarkkailemiseksi. Pohdittiin myös ELISA-menetelmässä ilmeneviä haasteita sekä pipetointitekniikkaa.
ELISA-menetelmän todettiin olevan luotettava tapa tutkia suuria näytemääriä.