Verinäytteiden säilyvyys kliinisen kemian ja immunokemian tutkimuksissa

Abstract

Opinnäytetyön tarkoituksena oli verinäytteiden säilyvyyden tutkiminen eri olosuhteissa ja -muodoissa. Tutkimuksessa oli mukana yhteensä 32 kliinisen kemian ja immunokemian analyyttiä, ja se tehtiin yhteistyössä HUSLABin Automaatiolaboratorion kanssa.

Tutkimuksella selvitettiin, kuinka analyytit säilyvät aikaisempaan vertailukelpoiseen tietoon verrattaessa ja vastaavatko saadut tulokset menetelmävalmistajan antamaa ohjeistusta. Tutkimus tehtiin käytettäväksi analyyttien säilyvyysohjeistusten päivitystarpeen arvioimisessa. Verinäytteet tutkimusta varten otettiin 25 vapaaehtoiselta Metropolia ammattikorkeakoulun bioanalyytikko-opiskelijalta ja jokaista analyyttiä kohden oli kymmenen rinnakkaisnäytettä. Analysointituloksia saatiin yhteensä yli 11 500.

Tutkittavia olosuhteita olivat huone- ja jääkaappilämpötila (+ 4 °C), joissa näytteitä säilytettiin kolmessa eri muodossa: kokoverenä, sentrifugoituna ja eroteltuna. Sentrifugoidussa muodossa näyte säilytettiin solujen tai geelin päällä. Näytteitä säilytettiin seitsemän vuorokautta ja ne määritettiin vuorokauden välein viikonloppua lukuun ottamatta, saaden tuloksia vuorokausille 1 - 4 ja 7. Immunokemian huonelämpötilanäytteet määritettiin myös kuuden tunnin kohdalla. Tulokset analysoitiin käyttäen Dahlbergin kaavaa osoittamaan tulostason muuttumista ja HUSLABin laatutavoitearvoja määrittämään sallittua variaatiota.

Tutkimuksella saatiin sekä vahvistavaa että poikkeavaakin tietoa näytteiden säilyvyydestä verrattaessa aikaisempaan käsitykseen ja tehtyihin tutkimuksiin. Myös uutta ja mahdollisesti käyttökelpoista tietoa ilmeni muutaman analyytin kohdalla. Esimerkiksi B12-vitamiini ja folaatti säilyivät tutkimuksessa oletetun säilyvyytensä lisäksi myös kokoverenä. Kalium säilyi tyypillisesti vain eroteltuna ja keruloplasmiini sekä magnesium jäivät puolestaan huomattavasti alle odotetun säilyvyyden.

The aim of this thesis was to study the stability of blood samples in different storage conditions and forms. The focus was on 32 analytes from clinical chemistry and immunochemistry, and the study was conducted in cooperation with clinical biochemists working in HUSLAB Automation Laboratory.

The obtained results concerning the suitable storage conditions were compared with the existing laboratory instructions to estimate the need to revise them according to the new data. Furthermore, the results were compared with the information given by the manufacturer as well as results published earlier in scientific articles. Also, this study was conducted to see how long the samples can be stored as whole blood. Blood samples for this study were taken from 25 students from the Metropolia UAS. In addition, 10 collateral samples were taken for each analyte. In total, over 11 500 result entries were gained.

Two different storage conditions were used in this study: room temperature and refrigerator temperature (+ 4 °C). Stored samples were in three different forms: whole blood, centrifuged and plasma/serum separated. Samples in centrifuged form were kept either on top of the cells or on the gel. The samples were stored for 7 days in different conditions and results were gathered from day 1 to 4 and on the 7th day. In addition, the immunochemistry analytes stored in room temperature were determined after six hours of storing. The results were analyzed by using the Dahlberg's formula to describe the conversion level changes within every analyte and sample format. Also, the quality target values of HUSLAB to determine acceptable variations between results.

The results obtained in this study were, depending on the analyte, either in line or contradictory with the previously reported data or general understanding about the suitable storage conditions of the samples in the laboratory. For example, phosphate and homocysteine were in line with the known storage life. Also, potassium remained typically only when separated. Exceptionally, keruloplasmin and magnesium did not remain as previously were thought. Totally new data was obtained for example with B12-vitamin and folate: these analytes remained in whole blood samples in addition to their previously known storage life.