Endogeeniset opioidit stressin mittaamisessa

Abstract

Beta-endorfiini on elimistön tuottama mielihyvähormoni, jonka pitoisuus vaihtelee eri vuorokaudenaikoina. Stressi ja masennus ovat tiloja, joiden diagnosoimiseen ei ole olemassa yksiselitteistä mittaria. Tässä opinnäytetyössä oli tarkoituksena kehittää menetelmä beta-endorfiinipitoisuuksien määrittämiseksi kilpailevaa ELISA-menetelmää käyttäen ja selvittää, voiko beta-endorfiinia käyttää stressin ja/tai masennuksen merkkiaineena. Työn aihe saatiin toimeksiantajalta BioOption Oy:ltä.

Tutkittavana aineistona käytettiin olemassa olevia seerumi- ja sylkinäytteitä, jotka olivat peräisin sekä stressaantuneilta että ei-stressaantuneilta henkilöiltä. Beta-endorfiinipitoisuuksien mittaukset tehtiin ELISA-menetelmällä ja käytettiin kaksoisvasta-ainetekniikkaa. Saatuja mittaustuloksia verrattiin kirjallisuudesta löydettyihin tuloksiin sekä samoista näytteistä mitattuihin kortisolipitoisuuksiin.

Stressaantuneiden henkilöiden beta-endorfiini- ja kortisolipitoisuudet näyttävät noudattavan samansuuntaista vuorokausivaihtelua. Muiden mittauksien osalta ei pysty tekemään johtopäätöksiä. Kirjallisuudesta löydetty beta-endorfiinipitoisuuksien vuorokauden aikainen vaihtelu näyttää noudattavan stressaantuneilla henkilöillä yhtenäistä linjaa. Lisäksi käyttämämme mittausaineisto oli pieni ja kaikista mittauksista ei saatu tuloksia, joten siitä ei voi tehdä yleistettäviä johtopäätöksiä.

Beta-endorfiinin mittausmenetelmää voisi kehittää edelleen, jotta se olisi vähemmän herkkä erilaisille häiriötekijöille. Beta-endorfiinipitoisuudet ovat erittäin pieniä, kuten myös pipetoitavat näytemäärät, jolloin virheellisten mittaustulosten todennäköisyys kasvaa.

Beta-endorphin is an endogenous opioid, and its secretion follows a diurnal rhythm. There are no unambiguous methods for diagnosing stress and depression. The purpose of this study was to develop a method for measuring the beta-endorphin concentrations by using the competitive ELISA method, to find out if beta-endorphin can be used as a biomarker for stress and/or depression. The study was assigned by BioOption Oy.

The material in this study comprised of serum and saliva samples. The same samples were used in a previous study and they were collected from stressed and non-stressed persons. The beta-endorphin concentrations were measured with the competitive ELISA method, using the double antibody technique. The measured concentrations were compared to other studies and cortisol concentrations in measured from the same samples in previous studies.

The findings revealed that beta-endorphin and cortisol concentrations appear to have similar diurnal variation among stressed persons. Regarding the other measurements, too few results were gained to make further conclusions. In literature, beta-endorphin concentrations seem to follow a similar diurnal rhythm among stressed people. Furthermore, the amount of used serum and salive samples was small in this study, and results were not gained from all of the measurements: therefore generalized conclusions cannot be withdrawn.

The beta-endorphin concentration measurement method could be further developed so that it would be less sensitive to different distracting factors. Both beta-endorphin concentrations and pipetting sample amounts are extremely low, and thus the probability of incorrect measurement results is higher.