Subkloonaus ja restriktioentsyymianalyysi : Molekyylibiologian ja geeniteknologian harjoitustyön kokoaminen Savonia-ammattikorkeakoulun bioanalytiikan koulutusohjelmalle
Vuorenpää, Maija (2010)
Vuorenpää, Maija
Savonia-ammattikorkeakoulu
2010
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-201005139168
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-201005139168
Tiivistelmä
Molekyylibiologia on biologian osa-alue, jossa tarkastellaan solun toimintaa molekyylitasolla. Viime vuosikymmeninä huimasti kehittyneet molekyylibiologiset tutkimusmenetelmät, kuten DNA:n muokkaaminen, kopioiminen ja kloonaamien, muodostavat geenitekniikan kokonaisuuden. Yksi geenitekniikan osa-alue on yhdistelmä-DNA-tekniikka, jonka menetelmien avulla voidaan siirtää ja liittää yhteen eri lähteistä peräsin olevaa geneettistä materiaalia.
Bioanalytiikan koulutukseen kuuluvat molekyylibiologian ja geeniteknologian opinnot. Savonia-ammattikorkeakoulussa bioanalytiikan koulutuksen syventävästä vaiheesta on kuitenkin puuttunut molekyylibiologian ja geeniteknologian osalta koululla suoritettava harjoitustyö. Tämän opinnäytetyön tarkoituksena oli koota harjoitustyö bioanalyytikko-opiskelijoiden molekyylibiologian ja geeniteknologian opintoihin. Harjoitustyö validoitiin eli sen toimivuus testattiin Sairaalakadun kampuksen laboratoriotiloissa käytössä olevilla välineillä ja sen toteuttamista varten luotiin työohje.
Harjoitustyön aiheeksi valittiin subkloonaus ja restriktioentsyymianalyysi. Subkloonauksen tarkoituksena on liittää eristettyyn plasmidi-DNA:han vieraasta DNA:sta peräisin oleva insertti restriktioentsyymikäsittelyn avulla. Syntynyt yhdistelmäplasmidi transformoidaan E. coli -bakteeriin, jonka replikaatiokoneiston avulla yhdistelmäplasmidia monistetaan. Monistuksen tarkoituksena on tuottaa yhdistelmäplasmidia, jotta se voidaan eristää bakteerista ja tarkistaa restriktioentsyymianalyysillä insertin siirtyminen yhdistelmäplasmidiin.
Opinnäytetyössä koottu harjoitustyökokonaisuus parantaa Savonia-ammattikorkeakoulusta valmistuvien bioanalyytikkojen ammattitaitoa ja auttaa heitä vastaamaan työelämän haasteisiin. Harjoitustyökokonaisuus on hyödynnettävissä osana bioanalyytikkojen koulutusta, ja sitä on mahdollista käyttää myös bioanalyytikkojen ja laboratoriohoitajien täydennyskoulutuksessa.
Bioanalytiikan koulutukseen kuuluvat molekyylibiologian ja geeniteknologian opinnot. Savonia-ammattikorkeakoulussa bioanalytiikan koulutuksen syventävästä vaiheesta on kuitenkin puuttunut molekyylibiologian ja geeniteknologian osalta koululla suoritettava harjoitustyö. Tämän opinnäytetyön tarkoituksena oli koota harjoitustyö bioanalyytikko-opiskelijoiden molekyylibiologian ja geeniteknologian opintoihin. Harjoitustyö validoitiin eli sen toimivuus testattiin Sairaalakadun kampuksen laboratoriotiloissa käytössä olevilla välineillä ja sen toteuttamista varten luotiin työohje.
Harjoitustyön aiheeksi valittiin subkloonaus ja restriktioentsyymianalyysi. Subkloonauksen tarkoituksena on liittää eristettyyn plasmidi-DNA:han vieraasta DNA:sta peräisin oleva insertti restriktioentsyymikäsittelyn avulla. Syntynyt yhdistelmäplasmidi transformoidaan E. coli -bakteeriin, jonka replikaatiokoneiston avulla yhdistelmäplasmidia monistetaan. Monistuksen tarkoituksena on tuottaa yhdistelmäplasmidia, jotta se voidaan eristää bakteerista ja tarkistaa restriktioentsyymianalyysillä insertin siirtyminen yhdistelmäplasmidiin.
Opinnäytetyössä koottu harjoitustyökokonaisuus parantaa Savonia-ammattikorkeakoulusta valmistuvien bioanalyytikkojen ammattitaitoa ja auttaa heitä vastaamaan työelämän haasteisiin. Harjoitustyökokonaisuus on hyödynnettävissä osana bioanalyytikkojen koulutusta, ja sitä on mahdollista käyttää myös bioanalyytikkojen ja laboratoriohoitajien täydennyskoulutuksessa.