Fluoresoivilla Europium-kelaateilla leimatun vasta-aineen toimivuus NT-proBNP-immunomäärityksessä
Jaakkola, Mikael (2019)
2019
All rights reserved. This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2019091118414
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2019091118414
Tiivistelmä
Opinnäytetyön tavoitteena oli tutkia viiden erilaisen leimareagenssin (luminoivien lantanidikelaattien) toimivuutta NT-proBNP-immunomäärityksessä sekä niiden ominaisuuksien vaikutusta toimivuuteen.
Leimareagenssit konjugoitiin vasta-aineeseen ja ne testattiin NT-proBNP-immunomäärityksessä sekä käsin tehtävällä määrityksellä että kuivattuna AQT90 FLEX -immunoanalysaattorilla. Leimatuista vasta-aineista mitattiin ja laskettiin kelaattien fotofysikaalisia ominaisuuksia.
Tutkimuksen tuloksena on referenssiä neljä kertaa kirkkaampi Europium-kelaatti. Sen toimivuutta todennettiin NT-proBNP-vasta-aineen lisäksi kahdella muulla analyytillä. Moninkertainen kirkkaus tarkoittaa korkeampaa signaalitasoa, jota voidaan hyödyntää määrityksen herkkyyden nostamisessa. The aim of the thesis was to study the performance of five different labeling reagents (luminescent lanthanide chelates) in the NT-proBNP immunoassay and the effect of chelate properties on functionality.
The labeling reagents were conjugated to the antibody and were tested in the NT-proBNP immunoassay both manual assay and dried with AQT90 FLEX immunoanalyzator. The photo-physical properties of labeling reagents were measured and calculated from labeled antibodies.
The result of this study is a four-fold brighter Europium chelate than reference chelate. Its performance was verified with two other analytes. Higher brightness means a higher signal level that can be utilized to increase the sensitivity of the assay.
Leimareagenssit konjugoitiin vasta-aineeseen ja ne testattiin NT-proBNP-immunomäärityksessä sekä käsin tehtävällä määrityksellä että kuivattuna AQT90 FLEX -immunoanalysaattorilla. Leimatuista vasta-aineista mitattiin ja laskettiin kelaattien fotofysikaalisia ominaisuuksia.
Tutkimuksen tuloksena on referenssiä neljä kertaa kirkkaampi Europium-kelaatti. Sen toimivuutta todennettiin NT-proBNP-vasta-aineen lisäksi kahdella muulla analyytillä. Moninkertainen kirkkaus tarkoittaa korkeampaa signaalitasoa, jota voidaan hyödyntää määrityksen herkkyyden nostamisessa.
The labeling reagents were conjugated to the antibody and were tested in the NT-proBNP immunoassay both manual assay and dried with AQT90 FLEX immunoanalyzator. The photo-physical properties of labeling reagents were measured and calculated from labeled antibodies.
The result of this study is a four-fold brighter Europium chelate than reference chelate. Its performance was verified with two other analytes. Higher brightness means a higher signal level that can be utilized to increase the sensitivity of the assay.