Enterovirusinfektiot lapsilla ja infektioiden yhteys tyypin 1 diabetekseen

Abstract

Tyypin 1 diabetes on elinspesifinen autoimmuunitauti, jonka puhkeamiseen uskotaan geneettisten tekijöiden ohella vaikuttavan myös ympäristötekijät. Enteroviruksia pidetään tällä hetkellä yhtenä pääympäristötekijänä diabeteksen kehityksessä.

Työssä määritetiin tyypin 1 diabetekselle geneettisesti alttiiden tutkimushenkilöiden nenäerite- ja ulostenäytteissä mahdollisesti esiintyviä ihmisen enteroviruksia ja tyypitetiin ne geneettisesti. Työn tavoitteena oli selvittää, kuinka yleisiä enterovirusinfektiot ovat tyypin 1 diabetekselle geneettisesti alttiilla lapsilla ja miten infektioita esiintyy eri ikäluokissa. Tavoitteena on myös löytää tutkimushenkilöiden keskuudesta mahdollisia infektioherkkiä lapsia ja lapsia, joilla enterovirusinfektiot ovat pitkittyneitä.

Potilasnäytteistä detektoitiin enteroviruksia käyttäen reaaliaikaista PCR-menetelmää. Näytteiden mahdollisesti sisältämät infektiiviset enterovirukset eristettiin soluviljelymenetelmällä. Työssä käytetty enterovirusten molekulaarinen tyypitys perustuu RT-PCR:ään ja VP1-kapsidiproteiinia koodaavan genomialueen sekvensointiin.

Tutkimuksessa havaittiin, että suurin osa enterovirusinfektioista sairastettiin alle 18 kuukauden iässä. Enteroviruksia esiintyi suolistossa eniten loppukesästä, kun taas hengitysteissä niiden (rino/enterovirusten) havaittiin aiheuttavan infektioita eniten loppukeväällä ja alkusyksystä. Tutkimushenkilöistä löydettiin yksi lapsi, jonka epäiltiin sairastaneen pitkittynyt EV68-infektio. Työtä suoritettaessa heräsi myös epäilys siitä, että hengitystievirukseksi leimattu EV68 voisi lisääntyä myös suolistossa. Työssä onnistuttiin tyypittämään CVA2-, CVA5-, EV68- ja HRV49-viruksia. Työn tulokset ovat apuna suuremman tutkimuksen toteutuksessa, jossa pyritään kartoittamaan virusinfektiot, jotka tutkimuslapset sairastavat ennen tyypin 1 diabetekseen sairastumistaan.

Type 1 diabetes is an organ-specific autoimmune disease that may be triggered by genetical and environmental factors. Enteroviruses are considered as one of the main candidates for an environmental trigger of type 1 diabetes.

In this thesis project the enteroviruses of the nasal swab and fecal samples collected from people having an increased genetic risk for type 1 diabetes were determined and genetically typed. The aim of this study was to investigate how common enterovirus infections are and how their straddle different ages groups. Another aim was to find among the study subjects potential children with higher susceptibility to enterovirus infections and children with prolonged enterovirus infections.

Enteroviruses were detected from patient samples using real-time PCR assay. Infectious enteroviruses were isolated in cell cultures. Molecular typing used in the study is based on RT-PCR and amino acid sequencing of the VP1 capsid protein.

The project found that the most of the enterovirus infections were suffered under the age of 18 months. Intestinal enterovirus infections occurred mainly at the end of summer. Rino/enteroviruses cause respiratory infections mainly at the end of spring and early fall. One of the subjects was suspected to have prolonged EV68-infection. Consequently, a suspicion arose that EV68, which is usually considered as a respiratory virus, could also replicate itself in the intestine. The results of this study are part of a larger research which aim is to detect virus infections that the study subjects have suffered before type 1 diabetes is potentially triggered.