Laaduntarkkailunäytteiden valmistus immunohistokemiallisiin värjäyksiin Oulun yliopistollisen sairaalan patologian laboratorioon

Abstract

TIIVISTELMÄ

Tämän projektiluonteisen opinnäytetyön tarkoituksena oli valmistaa immunohistokemialliset laaduntarkkailunäytteet osaksi Oulun yliopistollisen sairaalan patologian laboratorion sisäistä laaduntarkkailujärjestelmää.

Immunohistokemialla on tärkeä merkitys diagnostisessa patologiassa kasvainmuutosten paikannuksessa ja tunnistuksessa. Immunohistokemiallisten menetelmien käyttö perustuu kudosnäytteestä paikannettavaan spesifiseen vasta-aine-antigeenireaktioon, joka visualisoidaan mikroskooppisesti havaittavaksi reaktioon lisättävän väriaineen avulla. Kudosantigeenit paikannettiin kaksivaiheista polymeeritekniikkaa hyödyntävällä detektiomenetelmällä. Tekniikka perustuu antigeeneihin tarttuneiden primaarivasta-aineiden osoittamiseen sekundaarivasta-aineita ja entsyymimolekyylejä sisältävällä polymeerillä. Tarvittava kudosmateriaali kerättiin laboratorion omasta kudosarkistosta. Vasta-ainevärjäyksiä varten valittiin 18 kappaletta laboratorion kasvaindiagnostiikassa käytössä olevaa kaupallista vasta-ainetta.

Työn toiminnallisena tavoitteena oli patologian laboratorion immunohistokemiallisen tutkimuksen laadunvarmistus ja kehittäminen. Projektin välitön hyödynsaaja ja tuotteen käyttäjä on patologian laboratorion immunohistokemiallisista tutkimuksista vastaava henkilöstö. Tarkoituksena oli, että he saavat näytteet päivittäiseen käyttöönsä varmistamaan näytteenvalmistuksen luotettavuuden ja tukemaan oikeaa diagnoosia. Tasokas patologian laboratoriopalvelu taataan asiakkaille saavuttamalla hyvä laatutaso, ylläpitämällä se ja kehittämällä sitä.

Kohderakenteiden spesifi värjäytyminen kudosnäytteistä osoitti antigeenien paikannuksen onnistuneen. Laaduntarkkailunäytteiden valmistus onnistui sekä menetelmällisesti että kudosmateriaalin ja vasta-aineiden valinnan värjäystulosten ollessa odotetut. Omassa laboratoriossa käsiteltävien laaduntarkkailunäytteiden valmistus on jo jatkunut Oulun yliopistollisen sairaalan patologian laboratoriossa.

ABSTRACT

The purpose of this project-like bachelor´s thesis was to produce immunohistochemical control specimens to be part of the internal quality control of the pathology laboratory in the Oulu University Hospital. The goal was to ensure and develop quality of the laboratory procedures.

Immunohistochemistry has become an essential adjunct to diagnostic pathology. Immunohistochemical method localizes and identifies a specific antigen in a tissue specimen using a method based on the specificity and sensitivity of reaction between antigen and primary antibody. The reaction is visualized under a microscope with the use of a chromogen. Two-step staining protocol with polymer technique utilizes secondary antibodies which identify enzymes and primary antibodies. Tissue specimens used for controls were collected from the laboratory´s own archive material and 18 pieces of commercial primary antibodies were chosen for the antigen staining.

The practical goal of the thesis was to prepare controls for the routine use of the laboratory personnel responsible for the immunohistochemical staining at the pathology laboratory. Controls are needed for immunohistochemistry to ensure the reliability of the specimen processing. High- quality pathology laboratory service can be provided for clients by achieving, maintaining, and developing a good quality level.

Antigen localization with polymer technique was successful. The staining results of the control specimens do perform as expected. Preparations of in house controls have already been continued in the pathology laboratory in the Oulu University Hospital.