Reniini-angiotensiinijärjestelmän merkitys suoliston läpäisevyydessä: Angiotensiini II:n, angiotensiini (1–7):n ja tiivisliitosproteiinien yhteys
Häme, Annika (2020)
Häme, Annika
2020
All rights reserved. This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-202005118296
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-202005118296
Tiivistelmä
Suoliston limakalvo valvoo aineiden kulkeutumista epiteelin läpi ja lisääntyneeseen suoliston läpäisevyyteen on liitetty useita sairauksia, kuten tulehdukselliset suolistosairaudet. Suolen limakalvon solujen välissä olevat tiivisliitokset, jotka koostuvat tiivisliitosproteiineista, liittävät epiteelisolut yhteen ja ovat tärkeitä suolen epiteelin ylläpitämisessä. Niiden vaurioituminen sekä toimintahäiriöt on yhdistetty suoliston lisääntyneeseen läpäisevyyteen.
Verenpainetta ja nestetasapainoa säätelevä reniini-angiotensiinijärjestelmä (RAS) toimii myös paikallisesti suolistossa, jossa se osallistuu mm. tulehduksen syntymiseen. RAS:n vaikutukset ilmenevät, kun angiotensiiniä konvertoiva entsyymi (ACE) muodostaa angiotensiini II:a (ang II), joka sitoutuu angiotensiini tyypin1 reseptoriin (ATR1). Ang II/ATR1 -akseli edistää tulehduksen kehittymistä ja muita haitallisia vaikutuksia. Toisessa RAS:n vaikutusreitissä angiotensiiniä konvertoiva entsyymi 2 (ACE 2) muodostaa angiotensiini 1–7:ää (ang (1–7)), joka sitoutuu mas- reseptoriin (MasR). Ang (1–7) /MasR -akselin vaikutukset ovat päinvastaisia verrattuna edelliseen.
Työn tarkoituksena oli selvittää ang II:n ja ang (1–7):n vaikutusta tiivisliitosproteiineihin määrittämällä kolme eri tiivisliitosproteiinia, okludiini, klaudiini-1 ja klaudiini-4, Western blot -menetelmällä hiiren ohut- ja paksusuolen inkubaationäytteistä. Lisäksi Western blot -menetelmää optimoitiin kyseisille proteiineille.
Okludiinin, klaudiini-1:n ja klaudiini-4:n proteiinitasot saatiin määritetyksi ja Western blot -menetelmää optimoitiin. Ang II vähentää klaudiini-4:ää paksusuolessa verrattuna ang II +ang (1–7) -näyteryhmään tilastollisesti merkitsevästi. Myös muut tiivisliitosproteiinit näyttäisivät vähenevän ohut- ja paksusuolessa ang II:n vaikutuksesta, joskaan tilastollisia eroja ei havaittu. Menetelmää voitaisiin parantaa lisäämällä geeleille tunnettu kontrollinäyte saman ajon eri geelien välisen eron pienentämiseksi.
Verenpainetta ja nestetasapainoa säätelevä reniini-angiotensiinijärjestelmä (RAS) toimii myös paikallisesti suolistossa, jossa se osallistuu mm. tulehduksen syntymiseen. RAS:n vaikutukset ilmenevät, kun angiotensiiniä konvertoiva entsyymi (ACE) muodostaa angiotensiini II:a (ang II), joka sitoutuu angiotensiini tyypin1 reseptoriin (ATR1). Ang II/ATR1 -akseli edistää tulehduksen kehittymistä ja muita haitallisia vaikutuksia. Toisessa RAS:n vaikutusreitissä angiotensiiniä konvertoiva entsyymi 2 (ACE 2) muodostaa angiotensiini 1–7:ää (ang (1–7)), joka sitoutuu mas- reseptoriin (MasR). Ang (1–7) /MasR -akselin vaikutukset ovat päinvastaisia verrattuna edelliseen.
Työn tarkoituksena oli selvittää ang II:n ja ang (1–7):n vaikutusta tiivisliitosproteiineihin määrittämällä kolme eri tiivisliitosproteiinia, okludiini, klaudiini-1 ja klaudiini-4, Western blot -menetelmällä hiiren ohut- ja paksusuolen inkubaationäytteistä. Lisäksi Western blot -menetelmää optimoitiin kyseisille proteiineille.
Okludiinin, klaudiini-1:n ja klaudiini-4:n proteiinitasot saatiin määritetyksi ja Western blot -menetelmää optimoitiin. Ang II vähentää klaudiini-4:ää paksusuolessa verrattuna ang II +ang (1–7) -näyteryhmään tilastollisesti merkitsevästi. Myös muut tiivisliitosproteiinit näyttäisivät vähenevän ohut- ja paksusuolessa ang II:n vaikutuksesta, joskaan tilastollisia eroja ei havaittu. Menetelmää voitaisiin parantaa lisäämällä geeleille tunnettu kontrollinäyte saman ajon eri geelien välisen eron pienentämiseksi.