Vertailututkimus laajakirjoista beetalaktamaasia tuottavien bakteerien kasvatusmaljoista

Abstract

Tutkimus tehtiin Lapin keskussairaalan Kliinisen mikrobiologian laboratoriolle. Tarkoituksena työssä oli vertailla neljää kaupallisesti tuotettua ESBL-maljaa sekä Lapin keskussairaalassa käy-tettävää selektiivistä CLED-maljaa ja selvittää, mikä näistä viidestä maljasta on tehokkain ESBL- kantojen tunnistuksessa. Lapin keskussairaalan mikrobiologian laboratorio voi käyttää tutkimuk-sessa saatuja tuloksia päätöksenteossa kaupallisten ESBL-maljojen käyttöönotosta.

Maljoille viljeltävät näytteet olivat seulontanäytteitä sekä positiivisia kontrollikantoja ja referenssi-kantoja. Seulontanäytteet olivat laadultaan ulostetta, virtsaa ja haavaeritettä. Tutkimuksen aikana 102 näytettä viljeltiin viidelle erilaiselle maljalle. Bakteerikasvua ja pesäkemorfologiaa tarkasteltiin maljoilta silmämääräisesti. Maljojen selektiivisyyttä vertailtiin tunnistamalla kaikki maljoilla kasva-vat bakteerit. Tutkimuksessa vertailtiin sekä ESBL-kantojen kasvua että varmistustestien toimi-vuutta suoraan maljoilta ja puhdasviljelmistä.

Tulosten perusteella kaikki ESBL-positiiviset kannat kasvoivat maljoilla yhtä runsaina, poikkeuk-sena yksi ESBL-positiivinen potilasnäyte, joka ei kasvanut ollenkaan BD Drigalski Lactose Agar with Ceftazidime -maljalla. Selektiivisellä CLED-maljalla kasvoi kaikista eniten muita kuin ESBL-kantoja ja BD Drigalski Lactose Agar with Ceftazidime -maljalla toiseksi eniten. Kromogeenisten maljojen välillä ei ollut suuria eroja selektiivisyydessä. Varmistustestejä vertaillessa yksi kontrolli-kanta ei antanut positiivista tulosta suoraan maljoilta, mutta puhdasviljelmästä tehdyt testit olivat positiivisia. Varmistustestivertailussa yksi selektiiviseltä CLED-maljalta tehty kaksoiskiekkotesti ei antanut positiivista tulosta, vaikka kyseessä oli ESBL-kontrollikanta.

Lapin keskussairaalalle olisi hyötyä ESBL-viljelyssä käytettävän selektiivisen CLED-maljan vaih-tamisesta johonkin kaupallisista maljoista. Kromogeenisten maljojen käyttöönotto vaatii henkilö-kunnan perehdyttämistä, mutta helpottaa ESBL-kantojen tunnistusta ja löydettävyyttä.

The thesis was commissioned by Laboratory of Clinical Microbiology of Lapland Central Hospital. The purpose of this thesis was to compare five different ESBL agars and examine which is the most effective for ESBL bacteria identification. Laboratory of clinical Microbiology can use the test results in their decision making when replacing the selective CLED agar with one of the commercial produced agars.

Samples in this study were patient samples and control and referent strains. 102 samples were cultured on five different agars. The amount of bacterium growth and colony morphology were observed. Selectivity of five agars was compared by recognizing every bacterium. In this study I compared also the growth of ESBL producing strains and the function of the confirmation test straight from the plate and from the pure culture.

The results showed that there were no differences between ESBL positive bacteria growths be-tween five different agars. Every strain except for one positive patient sample grew on every agar. The most unselective agars were Selective CLED agar and BD Drigalski Lactose Agar with Ceftazidime. There were no big differences between selectivity with chromogenic agars. Compar-ison of the confirmation test showed, that one of the ESBL control strain did not show positive re-sult in the first culture. One ESBL control strain did not show positive result in a double disc test from selective CLED agar.

Replacing the selective CLED agar for one of the commercially produced agars would be benefi-cial to Laboratory of Clinical Microbiology of Lapland Central Hospital. Commissioning chroma-gars requires good familiarization, but it can make the recognizing of ESBL easier.