Ihobiopsioiden immunofluoresenssivärjäys : käsivärjäysmenetelmän ja Ventana BenchMark™ system -värjäysautomaatin vertailu

Abstract

Immunofluoresenssin avulla voidaan määrittää antigeenin ja vasta-aineen välisiä vuorovaikutuksia solujen eri rakenteissa. Monissa ihotaudeissa immunofluoresenssitutkimus on välttämätön apuväline diagnostiikassa. Diagnostiikan kannalta on tärkeää saada mahdollisimman optimaalisia valmisteita, mutta nykyisin käytössä olevalla immunofluoresenssinäytteiden käsivärjäysmenetelmällä tähän ei ole aina pystytty. Opinnäytetyömme tarkoitus oli selvittää ihobiopsioiden immunofluoressenssivärjäysten eroja käsivärjäysmenetelmän ja VBM™-värjäysautomaatin välillä. Vertailimme menetelmiä herkkyyden, fluoresenssivärin laadun ja säilyvyyden osalta sekä henkilöstönäkökulmien ja kustannusten kannalta. Työmme toimeksiantaja oli Yhtyneet Medix Laboratoriot Oy (YML), patologian osasto. Värjäsimme näytteet käsimenetelmällä sekä Rochen Ventana BenchMark™ system (VBM™) -värjäysautomaatilla. Vertasimme menetelmien välisiä eroja herkkyydessä sekä niillä värjättyjen näytteiden fluoresenssivärin laadussa ja säilyvyydessä. Otimme huomioon myös reagenssien kustannusarviot sekä henkilökunnan toiveet ja mieltymykset. VBM™-automaatilla värjättyjen näytteiden fluoresenssivärin laatu osoittautui käsimenetelmää huomattavasti paremmaksi. Lisäksi VBM™ oli herkempi ja värjäysprosessi oli nopeampi kuin käsimenetelmä. Henkilökunta käyttäisi tämän tutkimuksen mukaan mieluummin VBM™-värjäysautomaattia kuin käsivärjäysmenetelmää. Fluoresenssin säilyvyys oli VBM™-automaatilla sekä kahden että neljän viikon säilytyksen jälkeen parempi kuin käsimenetelmällä värjätyillä näytteillä. Reagenssien kustannukset olivat kuitenkin automaattimenetelmällä suuremmat. VBM™-värjäysautomaatti sopii tämän tutkimuksen perusteella YML patologian osaston käyttöön, sillä näytteiden värjääminen automaatilla oli nopeaa, vaivatonta ja luotettavaa. Suosittelemmekin, että VBM™-värjäysautomaatti hankittaisiin YML patologian osastolle.

Immunofluorescence is a staining method that is used to demonstrate the presence of antibody bound to antigen in tissue. In many skin diseases, the evaluation of immunofluorescence in skin biopsies plays an essential role in diagnosing these diseases. To confirm accurate diagnoses, it is important to provide a consistent high-quality staining method. The main goal of our study was to compare the quality and stability of immunofluorescence staining performed by manual and automatic staining methods. The project was carried out at the Pathology Department of the United Medix Laboratories Ltd (YML), Helsinki, Finland. We stained the samples manually and with the automated Roche VentanaBanchMark™ System (VBM™). When staining was completed, we delivered the samples to the pathologist for interpretation. We compared the results from the perspective of sensitivity, staining quality, stability of immunofluorescence and easiness and usefulness for YML pathology laboratory. In addition, we compared the reagent cost estimates of both methods. As part of our comparison, we took into consideration the wishes and requirements of the laboratory personnel. We found that the VBM™ system was significantly more sensitive, far less time-consuming and provided staining with remarkably better quality than the manual method. In addition, the VBM™ system gained favour among the laboratory staff. The stability of immunofluorescence was better with the VBM™ system than with the manual method. However, the reagent expenses of the VBM™ system were relatively high. The results lead to the conclusion that the VBM™ system is in high demand at the laboratory. Thus, we recommend that the VBM™ system should be taken in use at the Pathology Department of YML.