Ulosteen kalprotektiinin menetelmävalidointi Evolis Twin Plus System -laitteella RIDASCREEN® Calprotectin -testiä käyttäen

Abstract

Suolistoalueen inflammatoriset tulehdukset ovat yleisiä väestössämme. Tulehduksellisia suolistosairauksia ovat haavainen paksusuolitulehdus ja Crohnin tauti. Näiden tautien oireet ovat hyvin samanlaisia, joten niiden tarkka diagnosointi on haastavaa ja vaatii usein invasiivisia toimenpiteitä, kuten mahasuolikanavan ja paksusuolen tähystyksiä sekä koe-palojen ottoa. Tutkimukset ovat osoittaneet, että suolistoalueella elimistön puolustussolujen eli valkosolujen erittämä kalprotektiini proteiinin pitoisuus korreloi hyvin suoliston tuleh-dustiloihin. Tästä johtuen ulosteen kalprotektiinipitoisuuden laboratoriomääritystä voidaan käyttää terveydenhuollossa sekä diagnostiikkaan että hoitovasteen arviointiin. Ulosteen kalprotektiini määritetään entsyymi-immunologisella menetelmällä. Opinnäytetyömme tarkoituksena oli validoida ulosteen kalprotektiinin määritys (F –Calpro 4803) VITA Terveyspalvelut OY VITA Laboratorion käyttöön RIDASCREEN® Calprotectin -testillä Bio-Radin Evolis Twin Plus System -laitetta hyödyntäen. Toteutimme menetelmävalidoinnin, jonka referenssiarvoina käytimme LADR GmbH-Labor Dr Kramer & Kollagen samalla menetelmällä jo tutkittuja näytteitä (n=67). Näiden lisäksi tutkimuksissa oli mukana ulkoisia laaduntarkkailunäytteitä. Tutkimme työssämme mene-telmän oikeellisuutta, uusittavuutta, lineaarisuutta sekä esikäsittelyn vaikutusta tuloksiin. Tämän validoinnin tulokset osoittavat, että kalprotektiinin mittausarvot poikkeavat refe-renssiarvoistaan, joten nämä määritystulokset eivät ole riittävät vaan vaativat edelleen jatkotutkimuksia. Tutkituista parametreista sarjojen sisäinen ja välinen toistettavuus, sekä lineaarisuus täyttää vaaditut ominaisuudet, mutta esikäsittelyvaiheen virhemahdollisuuksien minimointiin tulisi tämän tutkimuksen perusteella kiinnittää erityistä huomiota.

Inflammatory bowel area infections are common in Finland. Inflammatory bowel diseases are ulcerative colitis and Crohn's disease. Symptoms of these diseases are very similar and the specificity of the diagnosis is challenging and it often requires invasive examination, such as gastrointestinal and colonic endoscopies and biopsy sampling. Previous studies have shown that in the intestinal tract of the body's defence cells, white blood cells’ secreting the protein called calprotectin and its concentration correlates well with intestinal inflammatory conditions. As a result, faecal calprotectin concentration assay may be used for diagnostic and for the assessment of treatment response. Faecal calprotectin is defined by using the enzyme immunoassay method. The purpose of our study was to validate faecal calprotectin (F –Calpro 4803) for VITA Health Services VITA Laboratory with RIDASCREEN® Calprotectin test using Bio-Rad Evolis Twin Plus System equipment. We carried out the reference method for validation, where we used as reference values from the same method already investigated samples (n = 67) by LADR GmbH-Labor Dr Kramer & Kollagen. In addition, we used the external quality control samples. We studied the correctness, reproducibility, linearity and pre-treatment effect on the results of the method. Here we show that the calprotectin results got from the validation analysis differ from the values of the reference laboratory indicating that these results were not adequate and fur-ther studies are needed. Of the studied parameters, the reproducibility and the linearity met the required values. However, more attention should be paid to minimizing the errors caused by pre-treatment phase.