Fab-vasta-ainetuottomediumin Downstream-prosessit
Luukela, Milja (2013)
Oulun seudun ammattikorkeakoulu
2013
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2013052911572
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2013052911572
Tiivistelmä
Opinnäytetyö tehtiin Oulun yliopiston Biolääketieteen laitoksen fysiologian yksikössä. Yksikköön oli hankittu useita kuukausia aiemmin tangentiaalivirtaussuodatinlaite, jonka käyttöön ei kukaan ollut ehtinyt perehtyä. Laitteisto oli hankittu Fab-vasta-ainetuottomediumin konsentrointia silmällä pitäen, ja tässä työssä keskityttiin tutkimaan, soveltuuko laite kyseiseen toimintoon.
Fab-vasta-ainefragmentti on geenitekniikan avulla tuotettu vasta-aine. Sen tutkiminen on haastavaa tuottomediumin suuren tilavuuden ja Fab-vasta-aineen pienen pitoisuuden vuoksi. Tässä työssä tutkittiin, saadaanko tangentiaalivirtaussuodatinlaitteella konsentroitua tuottomediumia ilman, että haluttua vasta-ainetta menetetään. Näytteen rikastumista seurattiin Bradfordproteiinimäärityksen lisäksi ELISA-testillä ja Western blot -menetelmällä. Vastaainetta puhdistettiin affiniteettikromatografialla.
ELISA-testien ja Western blotin perusteella pystyttiin päättelemään, että konsentrointi onnistui hyvin ja laite täyttää odotukset.
Fab-vasta-ainefragmentti on geenitekniikan avulla tuotettu vasta-aine. Sen tutkiminen on haastavaa tuottomediumin suuren tilavuuden ja Fab-vasta-aineen pienen pitoisuuden vuoksi. Tässä työssä tutkittiin, saadaanko tangentiaalivirtaussuodatinlaitteella konsentroitua tuottomediumia ilman, että haluttua vasta-ainetta menetetään. Näytteen rikastumista seurattiin Bradfordproteiinimäärityksen lisäksi ELISA-testillä ja Western blot -menetelmällä. Vastaainetta puhdistettiin affiniteettikromatografialla.
ELISA-testien ja Western blotin perusteella pystyttiin päättelemään, että konsentrointi onnistui hyvin ja laite täyttää odotukset.