Val201-peptidin vaikutus rintasyöpäsolujen proliferaatioon

Abstract

Projektimuotoisen opinnäytetyömme tarkoituksena oli selvittää Val201-peptidin vaikutusta MCF-7-rintasyöpäsolujen proliferaatioon eli elinkelpoisuuteen. Projektimme tilaajana ja kustantajana toimi ValiRx Plc:n tytäryhtiö ValiRx Finland Oy ja se toteutettiin yhteistyössä Oulun seudun am-mattikorkeakoulun kanssa.

Opinnäytetyömme kahtena päätavoitteena oli kasvattaa riittävä määrä MCF-7-soluja ja selvittää Val201-peptidin vaikutusta soluproliferaatioon. Soluja viljeltiin tarvittava määrä, jonka jälkeen peptidin vaikutusta arvioitiin spektrofotometrisellä mittauksella kaupallista WST-1-Cell Proliferation -reagenssia apuna käyttäen. Peptidiä lisättiin syöpäsoluja sisältäville 96-kuoppalevyille viitenä eri pitoisuutena ja vastetta tarkasteltiin. Levyille lisättiin myös estrogeenihormonia vaihtelevina pitoisuuksina, ja käytettyjä altistusaikoja muunneltiin. Solujen elinkelpoisuutta tarkkailtiin koko soluviljelyn ajan, ja tästä tehdyn arvion mukaan soluja jaettiin kasvamaan uusiin viljelmiin.

Kontrolloimme proliferaatiokokeen tuloksia suorittamalla rinnakkaismittauksia sekä vertaamalla saatuja arvoja nollanäytteisiin. Mitattujen absorbanssiarvojen perusteella arvioimme solujen vas-tetta peptidille sekä reagenssien ja kontrollien toimivuutta. Käytimme pylväsdiagrammeja sekä rinnakkaisarvojen keskihajontaa tulosten esittämisessä ja tilastoinnissa.

Havaitsimme Val201-peptidin vaikuttavan estävästi rintasyöpäsolujen proliferaatioon kokeessa, jossa ulkopuolinen hormonialtistus puuttui. Sen sijaan hormonille altistettujen solujen proliferaatiossa estovaikutusta ei ollut havaittavissa. Tulosten perusteella arvioitiin Val201:n käyttömahdollisuuksia potentiaalisena rintasyöpälääkkeenä. Lääkkeen kehittelyyn liittyville jatkotutkimuksille todettiin olevan tarvetta.

The final project of our thesis was carried out in order to determine if Val201- peptide has an effect on MCF-7- breast cancer cell viability on a cell culture in vitro. Finding that the peptide has an ability to drive cancer cells into apoptosis, the assigner might be able to develop it into a drug. The publisher and assigner of our project were ValiRx Plc and its subdivision ValiRx Finland Oy and the work was carried out in cooperation with Oulu University of Applied Sciences.

Two main goals of the project were to grow a sufficient number of MCF-7 cells and to find out if Val201- peptide has an effect on cell proliferation. The required amount of cells was cultured after which the peptide was added into the cultures on 96-well plates using five different concentrations. Varying concentrations of hormone were also added on some of the plates and the time of exposure varied as well at each point of measurement. The response of the cells was measured with a spectrophotometer by using a commercial reagent kit WST-1. Cell viability was continuously monitored and new cultures were started throughout the whole cell culture phase of the project.

The project gave promising results with non-hormonal cancer cells showing that Val201 decreased their proliferation. However, the peptide did not seem to have visible effect on the cells with hormone promoting the growth. The results suggest that further research is needed.