Diffuusio-erotteisen spektroskopiamenetelmän kehitys käyttäen dekstraania sekä hiivaekstraktia

Abstract

Tämän työn tarkoituksena oli kehittää menetelmä käyttäen hyväksi DOSY (Diffusion ordered spectroscopy, diffuusio-erotteinen spektroskopia) -tekniikkaa. Luotua menetelmää on tarkoitus soveltaa muihin myöhemmin tapahtuviin tutkimuksiin. Aluksi opeteltiin DOSY-tekniikkaa mittaamalla erikokoisia dekstraanistandardeja. Tämän jälkeen menetelmää sovellettiin monipuoliseen hiivaekstraktinäytteeseen.

Työ suoritettiin käyttämällä VTT:n Bruker Avance III 600 MHz NMR-spektroskopia laitteistoa.

Mitattujen dekstraanistandardien diffuusiovakioita verrattiin tuloksiin, jotka oli saatu Varian Unity INOVA 600 MHz NMR -spektroskopia laitteistolla.

Diffuusiovakioiden ollessa sopusoinnussa Varian laitteella saatujen vakioiden kanssa, sovellettiin luotua tekniikkaa hiivanäytteeseen, joka oli peräisin Saccharomyces cerevisiae -kannasta.

Työn tavoitteet saavutettiin. Onnistuttiin luomaan menetelmä, jolla saatiin samoja tuloksia dekstraanistandardeille, sekä erottamaan hiivanäytteen yhdisteitä toisistaan. Hiivan kohdalla ei saatu kuitenkaan yhdisteitä tunnistettua.

The aim of this thesis was to develop a method using the DOSY technique. This method would then later be applied to new research topics. We started with getting familiar with the DOSY technique by measuring different sized dextran standards. The method in hand was then applied to a complex yeast-extract sample.

The conducted work was carried out using VTTs Bruker Avance III 600 MHz NMR spectrometer.

The resulting diffusion coefficients of the dextran standards were compared to the results from a different NMR machine, a Varian Unity INOVA 600 MHz model NMR machine.

Once the diffusion coefficients were in agreement with the Varian results, the method was applied to a yeast sample, extracted from the Saccharomyces cerevisiae species.

The set goals were achieved. We managed to create a method which yielded results that were in agreement with the results from the Varian machine. In addition we managed to separate the different components of the yeast sample from each other. Regrettably the components were not yet identified.