Vertailumenetelmän kehittäminen vasta-ainesensorille
Tuovinen, Teemu (2013)
Tuovinen, Teemu
Oulun seudun ammattikorkeakoulu
2013
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2013120620332
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2013120620332
Tiivistelmä
Opinnäytetyö tehtiin kesällä 2013 osana BioPrint-projektin #3-sensorimallin valmistusta. Työssä kehitettiin sandwich-ELISA-menetelmä antigeenin kvantitatiiviseen määrittämiseen käyttäen HRP-leimattua vasta-ainetta.
Painettujen sensorien avulla saadaan yksinkertaistettua ja nopeutettua esimerkiksi tarkkailua tai suurta otantaa vaativia testejä. Sensorit vaativat myös vähemmän näytettä, perinteiseen menetelmään verrattuna. Sensoreilla mitatessa testin suorittaja tarvitsee vähemmän koulutusta, kuin mitä vastaavan kliinisen testin suorittaminen vaatii. Sensorin kehityksestä saatavia tietoja voidaan tulevaisuudessa käyttää toisten vasta-ainesensorien kehitykseen. Vasta-ainesensoreilla puolestaan on todella suuri potentiaali terveydenhoidossa.
Työssä titrattiin sekä kaivoon sidotun, että leimana olevan vasta-aineen määrää testeissä. Työssä käytettiin valmiiksi monoklonaalisesti tuotettuja vasta-aineita, joita käytettään vastaavassa RIA-menetelmässä.
Menetelmää pyrittiin saamaan kliinisellä alueella lineaariseksi välillä 0–250 µg/l. Työtä hankaloitti vasta-aineiden ja antigeenin välisen affiniteetin suuruus, jonka seurauksena standardisuoran käytettävä lineaarisuusalue oli hyvin matalilla pitoisuuksilla, 0-640 ng/l.
Koska menetelmässä käytetyt vasta-aineet ja antigeeni ovat toimeksiantajan pyynnöstä luottamuksellisia, joten työssä keskitytään kuvaamaan sandwich-ELISAn kehitystä yleisellä tasolla sekä työssä esiintyneitä ongelmia.
Painettujen sensorien avulla saadaan yksinkertaistettua ja nopeutettua esimerkiksi tarkkailua tai suurta otantaa vaativia testejä. Sensorit vaativat myös vähemmän näytettä, perinteiseen menetelmään verrattuna. Sensoreilla mitatessa testin suorittaja tarvitsee vähemmän koulutusta, kuin mitä vastaavan kliinisen testin suorittaminen vaatii. Sensorin kehityksestä saatavia tietoja voidaan tulevaisuudessa käyttää toisten vasta-ainesensorien kehitykseen. Vasta-ainesensoreilla puolestaan on todella suuri potentiaali terveydenhoidossa.
Työssä titrattiin sekä kaivoon sidotun, että leimana olevan vasta-aineen määrää testeissä. Työssä käytettiin valmiiksi monoklonaalisesti tuotettuja vasta-aineita, joita käytettään vastaavassa RIA-menetelmässä.
Menetelmää pyrittiin saamaan kliinisellä alueella lineaariseksi välillä 0–250 µg/l. Työtä hankaloitti vasta-aineiden ja antigeenin välisen affiniteetin suuruus, jonka seurauksena standardisuoran käytettävä lineaarisuusalue oli hyvin matalilla pitoisuuksilla, 0-640 ng/l.
Koska menetelmässä käytetyt vasta-aineet ja antigeeni ovat toimeksiantajan pyynnöstä luottamuksellisia, joten työssä keskitytään kuvaamaan sandwich-ELISAn kehitystä yleisellä tasolla sekä työssä esiintyneitä ongelmia.