Fetaalihemoglobiinin mittaus sytokemiallisesti ja spektrofotometrisesti : Menetelmävertailu Islabin Puijon kemian ja hematologian laboratorioon

Abstract

Vastasyntyneen pääasiallinen hemoglobiinimuoto on fetaalihemoglobiini (HbF). Fetaalihemoglobiinitutkimusta käytetään, kun epäillään fetomaternaalivuotoa tai perinnöllisiä tauteja, joissa fetaalihemoglobiini on koholla. Fetaalihemo-globiinivärjäys on sytokemiallinen menetelmä, ja sitä käytetään fetomaternaalivuodon (FMH) osoittamiseen. Fetoma-ternaalivuoto on sikiöstä äitiin suuntautuva massiivinen verenvuoto, johon liittyy lähes aina lapsen vakava vammau-tuminen tai kuolema. Äidin verenkierrossa voidaan todeta sikiön punasoluja jopa 50 %:ssa raskauksista. FMH voidaan määrittää äidin veren sisältämän fetaalihemoglobiinin pitoisuudesta.

Opinnäytetyön tilaajana oli Itä-Suomen laboratoriokeskuksen liikelaitoskuntayhtymän (Islab) Puijon kliinisen kemian ja hemotologian laboratorio. Tämän opinnäytetyön tarkoituksena oli toteuttaa menetelmävertailu spektrofotometrisen ja sytokemiallisen menetelmän välillä. Tämän opinnäytetyön tarkoituksena oli saada tutkimustuloksia fetaalihemoglobiinimittauksen kahdesta eri menetelmästä. Fetaali-Hb-näytteitä mitattiin automaattisella menetelmällä ABL835 FLEX-verikaasuanalysaattorilla, joka sijaitsi Kuopion yliopistollisen sairaalan vastasyntyneiden teho-osastolla. Manu-aalinen menetelmä eli hemoglobiinin fetaalivärjäys suoritettiin Islabin kliinisen hematologian laboratoriotiloissa syksyllä 2013. Opinnäytetyön tavoitteena oli arvioida automaattisen menetelmän luotettavuutta. Opinnäytetyön tavoitteena oli toteuttaa menetelmävertailu laboratorioprosessin laatuvaatimusten mukaisesti.

Opinnäytetyössä käytettiin kokeellista, vertailevaa tutkimusmenetelmää. Tutkimusnäytteet koostuivat 18 vastasyntyneen näytteestä (n=18), jotka analysoitiin kahdella eri menetelmällä. Tutkimustulokset käsiteltiin tilastollisesti reg-ressioanalyysin, keskiarvon, keskihajonnan ja variaatiokertoimen avulla. Opinnäytetyössä saaduilla tuloksilla selvitettiin, saadaanko verikaasuanalysaattorilla tarpeeksi luotettavia fetaalihemoglobiinituloksia diagnostiseen käyttöön. Tutkimustulosten perusteella verikaasuanalysaattorin tulostaso oli matalampi kuin fetaalihemoglobiinivärjäyksen tulostaso. Tutkimuksessa saadut mittaustulokset eivät vaihdelleet merkittävästi menetelmien välillä, joten manuaalisen ja automaattisen menetelmän tulokset ovat keskenään vertailukelpoisia.

Fetal hemoglobin (HbF) is the main hemoglobin component in newborns. The measurement of fetal hemoglobin is used to investigate suspected fetomaternal hemorrhage or hereditary disorders where fetal hemoglobin is increased. Fetal hemoglobin staining is a cytochemical technique and it is used to detect fetomaternal hemorrhage. Fetomaternal hemorrhage is a massive bleeding from the fetus to the maternal circulation and it is nearly always associated with severe maternal morbidity or mortality. The detection of fetal erythrocytes in maternal blood is associated with 50 % of pregnancies. FMH is measured from the maternal blood by calculating the concentration of fetal cells.

The subscriber of this thesis was the Department of Puijo’s Clinical Chemistry and Hematology at Eastern Finland Laboratory Centre Joint Authority Enterprise (Islab). The purpose of the study was to carry out a comparison between spectrophotometric and cytochemical techniques. The purpose of the study was to have research results from fetal hemoglobin measurement with two different techniques. The fetal hemoglobin samples were measured with the automatic technique at the ABL835 FLEX blood gas analyzer which was located in the newborns’ intensive care unit at Kuopio University Hospital. The manual technique was carried out in the fall of 2013 at the laboratory of clinical hematology (Islab). The aim of the thesis was to evaluate the reliability of the automatic technique. The aim of the thesis was to carry out a comparison of two different techniques with the quality requirements of the laboratory process.

This thesis was empirical and comparative in nature. The study included 18 neonatal blood samples which were analyzed with two different techniques. The research results were processed statistically by using the regression analysis, arithmetic mean, standard deviation and coefficient of variation. With the results of this study it was attempted to find out if it is possible to get reliable fetal hemoglobin results with the blood gas analyzer for diagnostic use. These results suggest that the level of the result is smaller in the blood gas analyzer than in the fetal hemoglobin staining. The measurement between two different techniques didn’t vary significantly so the results of the manual and automatic techniques are comparable.