Furosemidin validointi happamien ja neutraalien lääkeaineiden analyysimenetelmään
Holappa, Jasmin (2022)
2022
All rights reserved. This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-202205149256
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-202205149256
Tiivistelmä
Opinnäytetyö tehtiin Terveyden ja hyvinvoinnin laitoksen Helsingin toimipisteen oikeuskemian osastolle. Tavoitteena opinnäytetyössä oli validoida furosemidi happamien ja neutraalien lääkeaineiden kvantitatiiviseen seulontamenetelmään (NEUT-SEUL) post mortem -verinäytteille. Seulontamenetelmän analyysilaitteistona toimii UPLC-PDA-CAD. Furosemidia on aikaisemmin tutkittu kvantitatiivisesti Terveyden ja hyvinvoinnin laitoksella LC-MS/MS-analyysimenetelmällä.
Furosemidi on loop-diureetiksi määritelty lääkeaine, jota käytetään esimerkiksi turvotusten ja resistentin hypertension eli vaikean verenpainetaudin hoitoon. Furosemidianalyysille tehtiin esivalidointi ja validointi, jotta kyseisen analyysimenetelmän toimivuus analyytin kvantitoimiseen varmistui. Furosemidille on aikaisemmin tehty kvalitatiivinen analyysi samalla analyysimenetelmällä. Validoinnissa analysoitiin vanhoja positiivisia furosemidinäytteitä vainajista. Vanhojen näytteiden tarkastelulla saatiin samoja tuloksia kuin aikaisemmallakin analyysimenetelmällä.
Alemmaksi määritysrajaksi saatiin validointitulosten perusteella 0,1 mg/l PDA-detektorille ja 0,3 mg/l CAD-detektorille. Toteamisrajaksi määritettiin pitoisuustaso 0,05 mg/l ja laajennetuksi mittausepävarmuudeksi saatiin 33 %:a luottamustasolla 95 %. Näytteiden matriisiefekti ei vaikuttanut furosemidin kvantitoimiseen. Toistettavuusnäytteiden suhteellinen keskihajonta jäi alle 20 %:n.
Validointitulokset täyttivät validointisuunnitelmassa asetetut vaatimukset. Furosemidi ei aiheuttanut määritysmenetelmässä olevien muiden analyyttien kromatogrammeihin häiriösignaaleja, ja menetelmä todettiin sopivaksi furosemidin kvantitatiiviseen analysoimiseen. Menetelmässä olevat muut analyytit eivät myöskään häirinneet itse furosemidin kvantitoimista.
Furosemidi on loop-diureetiksi määritelty lääkeaine, jota käytetään esimerkiksi turvotusten ja resistentin hypertension eli vaikean verenpainetaudin hoitoon. Furosemidianalyysille tehtiin esivalidointi ja validointi, jotta kyseisen analyysimenetelmän toimivuus analyytin kvantitoimiseen varmistui. Furosemidille on aikaisemmin tehty kvalitatiivinen analyysi samalla analyysimenetelmällä. Validoinnissa analysoitiin vanhoja positiivisia furosemidinäytteitä vainajista. Vanhojen näytteiden tarkastelulla saatiin samoja tuloksia kuin aikaisemmallakin analyysimenetelmällä.
Alemmaksi määritysrajaksi saatiin validointitulosten perusteella 0,1 mg/l PDA-detektorille ja 0,3 mg/l CAD-detektorille. Toteamisrajaksi määritettiin pitoisuustaso 0,05 mg/l ja laajennetuksi mittausepävarmuudeksi saatiin 33 %:a luottamustasolla 95 %. Näytteiden matriisiefekti ei vaikuttanut furosemidin kvantitoimiseen. Toistettavuusnäytteiden suhteellinen keskihajonta jäi alle 20 %:n.
Validointitulokset täyttivät validointisuunnitelmassa asetetut vaatimukset. Furosemidi ei aiheuttanut määritysmenetelmässä olevien muiden analyyttien kromatogrammeihin häiriösignaaleja, ja menetelmä todettiin sopivaksi furosemidin kvantitatiiviseen analysoimiseen. Menetelmässä olevat muut analyytit eivät myöskään häirinneet itse furosemidin kvantitoimista.