Alcian Blue-PAS-, PAS- ja Diastaasi-PAS-värjäysten validointi Sakura Tissue Tek Prisma® Plus värjäysautomaatille

Abstract

Histologisella tutkimuksella tarkoitetaan kudosnäytteen valomikroskooppista tarkastelua ja rakenteen arvioimista. Kudosnäytteitä tutkitaan erilaisten sairauksien aiheuttamien muutosten diagnosoimiseksi. Kudosnäytteen tutkiminen valomikroskoopilla edellyttää kudosleikkeen värjäämistä, joten histologiset värjäykset ovat keskeinen osa patologian laboratoriossa tehtävää diagnostiikkaa. Värjäysten laatu vaikuttaa diagnoosin luotettavuuteen.

Opinnäytetyön tarkoituksena oli verifioida uusi värjäysautomaatti Sakura Tissue Tek Prisma® Plus sekä validoida histologiset Alcian Blue-PAS-, PAS- ja Diastaasi-PAS-värjäykset laitteelle. Tarkoituksena oli laatia ohjeet laitteen käyttäjille värjäysten suorittamisesta, värjäysautomaatin käytöstä, huolloista sekä yleisimpien virhetilanteiden ratkaisuista. Työn tavoitteena oli histologisten värjäysten laadun kehittäminen sekä diagnostiikan luotettavuuden paraneminen. Tutkimustehtävinä olivat värjäysautomaatin käyttöönotto ja verifiointi sekä värjäysten optimointi ja validointi värjäysautomaatille.

Opinnäytetyö toteutettiin tutkimuksellisena kehittämistyönä Keski-Suomen sairaanhoitopiirin sairaala Novan patologian yksikössä. Kehittämistyössä käytetty näyteaineisto koostui jo aiemmin diagnosoiduista Keski-Suomen sairaanhoitopiirin patologian laboratorion parafiiniin valetuista kudosnäytteistä, joista leikattiin leikkeet laseille ja värjättiin värjäysautomaatilla. Värjäysten tulokset arvioitiin patologin ja sairaalasolubiologin toimesta arviointikaavakkeen avulla.

Kehittämistyön tuloksena saatiin käyttöönotettu ja verifioitu värjäysautomaatti sekä optimoidut ja validoidut värjäykset laboratorion käyttöön. Sairaalasolubiologi hyväksyi laiteverifioinnin sekä värjäysten validoinnit. Työn tuotoksina saatiin ohjeet laitteen käyttäjille värjäysautomaatin käytöstä, huolloista sekä värjäysten tekemisistä. Ohjeiden avulla värjäysautomaatin käyttö perehdytettiin histologian laboratorion työntekijöille.

Kehittämistyö oli osa patologian laboratorion menetelmien laadunvarmistusta. Aihe oli merkittävä työn tilaajalle, koska vanha värjäysautomaatti, jossa kehittämistehtävän kohteena olevat värjäykset tehtiin, ei siirtynyt muuton yhteydessä uuteen Sairaala Novaan. Validoidut värjäykset ovat histologian rutiinivärjäyksiä ja ilman niitä tiettyjen näytteiden diagnooseja ei pystytä tekemään. Verifiointi- ja validointiprosessia peilattiin lääketieteellisten laboratorioiden laatua ja pätevyyttä koskeviin Suomen standardoimisliitto SFS:n ISO 15189: 2012 vaatimuksiin, koska tulevaisuudessa laboratorio mahdollisesti akkreditoidaan.

Jatkokehittämisehdotuksena on HE-värjäyksen verifiointi värjäysautomaatille Tissue-Tek Prisma® H&E Staining Kit #1 värjäyskitillä. Se on laitevalmistajan toimesta validoitu värjäyskitti Sakura Tissue Tek Prisma® Plus värjäysautomaatille.