Evaluating Alternatives for the Detection of Saccharomyces cerevisiae var. diastaticus in a Brewing Environment
Reimi, Alina (2022)
Reimi, Alina
2022
All rights reserved. This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2022052311377
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2022052311377
Tiivistelmä
Opinnäytetyö toteutettiin Tallinassa sijaitsevalle Põhjala panimolle. Panimolla on oma laadunvalvontaan erikoistunut akkreditoitu laboratorio, jossa kemiallisia ja mikrobiologisia analyysejä tehdään panimon omille sekä panimolle lähetetyille ulkopuolisille tuotteille.
Työn aiheena oli löytää panimon käyttöön paremmin soveltuva kasvatusalusta diastatiivisen hiivakannan osoittamiseksi. Panimolla on ollut käytössä Omega-optimoitu Lin’s Cupric Sulfate -kasvatusalusta, joka sisältää reseptinmukaisen määrän kuparisulfaattia. Kasvatusalusta on kuitenkin antanut vääriä positiivisia tuloksia, kun kuivahiivalla fermentoituja olutnäytteitä on analysoitu. Käyttöön oli täten tarpeellista löytää kasvatusalusta, joka pystyisi vaimentamaan kuivahiivan kasvun, mutta havaitsemaan mahdollisen villihiivakontaminaation.
Kokeiluun valittiin käytössä ollut Lin’s Cupric Sulfate -media eri kuparisulfaattipitoisuuksilla, Lin’s Wild Yeast -media eri kristalliviolettipitoisuuksilla, sekä lysiinimedia. LCSM kasvatusalustalla panimohiivan kasvun inhibitioitumiseen vaikuttaa kuparisulfaatin toleranssi, jolle monet panimohiivat eivät ole sietokykyisiä. LWYM kasva-tusalustalla panimohiivan kasvua inhiboi kristallivioletti ja lysiinimedian villihiivoja detektoiva ominaisuus perustuu hiivan kykyyn käyttää lysiiniä ravinnonlähteenä.
Panimohiivanäytteenä käytettiin Lallemand Nottingham Ale -kuivahiivaa ja positiivisena kontrollinäytteenä Lallemand Belle Saison diastatiivis-positiivista kuivahiivaa. Maljaukset suoritettiin tehden neljä kontrollinäytettä, sekä positiivinen että nollanäyte. Laboratoriokokeita tehtiin viikoittain noin kolmen kuukauden ajan ja tulosten tarkastelun perusteella päätettiin, soveltuuko media käyttötarkoitukseen vai ei ja jatkettiinko kokeita kyseisellä medialla.
Käyttötarkoitukseen parhaiten soveltuvaksi kasvatusalustaksi osoittautui jo käytössä ollut LCS-media korkeammalla kuparisulfaattipitoisuudella. Median kuparisulfaattikonsentraatiota oli kokeiden perusteella tarpeellista nostaa 72 prosenttia. Alkuperäinen pitoisuus nousi tällöin 4,24 millimoolista 7,2 millimooliin 100 millilitraa kohden.
Työn aiheena oli löytää panimon käyttöön paremmin soveltuva kasvatusalusta diastatiivisen hiivakannan osoittamiseksi. Panimolla on ollut käytössä Omega-optimoitu Lin’s Cupric Sulfate -kasvatusalusta, joka sisältää reseptinmukaisen määrän kuparisulfaattia. Kasvatusalusta on kuitenkin antanut vääriä positiivisia tuloksia, kun kuivahiivalla fermentoituja olutnäytteitä on analysoitu. Käyttöön oli täten tarpeellista löytää kasvatusalusta, joka pystyisi vaimentamaan kuivahiivan kasvun, mutta havaitsemaan mahdollisen villihiivakontaminaation.
Kokeiluun valittiin käytössä ollut Lin’s Cupric Sulfate -media eri kuparisulfaattipitoisuuksilla, Lin’s Wild Yeast -media eri kristalliviolettipitoisuuksilla, sekä lysiinimedia. LCSM kasvatusalustalla panimohiivan kasvun inhibitioitumiseen vaikuttaa kuparisulfaatin toleranssi, jolle monet panimohiivat eivät ole sietokykyisiä. LWYM kasva-tusalustalla panimohiivan kasvua inhiboi kristallivioletti ja lysiinimedian villihiivoja detektoiva ominaisuus perustuu hiivan kykyyn käyttää lysiiniä ravinnonlähteenä.
Panimohiivanäytteenä käytettiin Lallemand Nottingham Ale -kuivahiivaa ja positiivisena kontrollinäytteenä Lallemand Belle Saison diastatiivis-positiivista kuivahiivaa. Maljaukset suoritettiin tehden neljä kontrollinäytettä, sekä positiivinen että nollanäyte. Laboratoriokokeita tehtiin viikoittain noin kolmen kuukauden ajan ja tulosten tarkastelun perusteella päätettiin, soveltuuko media käyttötarkoitukseen vai ei ja jatkettiinko kokeita kyseisellä medialla.
Käyttötarkoitukseen parhaiten soveltuvaksi kasvatusalustaksi osoittautui jo käytössä ollut LCS-media korkeammalla kuparisulfaattipitoisuudella. Median kuparisulfaattikonsentraatiota oli kokeiden perusteella tarpeellista nostaa 72 prosenttia. Alkuperäinen pitoisuus nousi tällöin 4,24 millimoolista 7,2 millimooliin 100 millilitraa kohden.