Val201-peptidin vaikutus signaalinsiirtoon hormoniriippuvaisissa rintasyöpäsoluissa

Abstract

Opinnäytetyömme tarkoituksena oli selvittää Val201-peptidin vaikutuksia hormoniriippuvaisten rintasyöpäsolujen signaalinsiirtoon. Työn tilaajana oli ValiRx Plc:n tytäryhtiö ValiFinn Oy, joka toimii Oulun ammattikorkeakoulun tiloissa. Työ toteutettiin projektina.

Työlle asetettiin kolme päätavoitetta, jotka olivat selvittää, vaikuttaako Val201-peptidi estävästi hormoniriippuvaisten rintasyöpäsolujen signaalin siirtymiseen estrogeenin sitoutuessa reseptoriinsa, pystyykö Val201-peptidi estämään signaalinsiirtäjäkinaasin (Src) kiinnittymistä reseptorin solukalvon sisäpuoliseen osaan sekä pystyykö Val201-peptidi estämään estrogeenivälitteisen ERK2-stimulaation ja siten solusyklin etenemisen S-vaiheeseen. Kokeita varten viljeltiin MCF-7-rintasyöpäsoluja, joita altistettiin eri pitoisuuksille estrogeeni- ja Val201-liuoksia. Saadut näytteet analysoitiin määrittäen niistä kokonaisproteiinipitoisuudet, fosforyloituneiden Src:n ja ERK:n sekä kokonais-ERK:n pitoisuusmuutokset.

Kinaasimääritykset tehtiin semikvantitatiivisesti ja tuloksista muodostettiin pylväsdiagrammit pitoisuuserojen havainnollistamiseksi. Reagenssien määrä oli rajallinen, joten rinnakkaismäärityksiin ei ollut mahdollisuutta. Kokeistamme saatujen tulosten perusteella Val201-peptidi on potentiaalinen lääke rintasyövän hoitoon, joskin lisätutkimuksia tarvitaan. Tulostemme mukaan Val201-peptidillä vaikuttaisi olevan suotuisissa olosuhteissa estävä vaikutus estrogeenivälitteiseen signaalinsiirtoon.

This thesis is a part of ValiRx Plc’s anti-cancer drug development project. The study was assigned to us by ValiFinn Oy, a subdivision of ValiRx Plc and the project was carried out in Oulu University of Applied Sciences and the Department of Physiology of Oulu University.

The aims of the project were to study if Val201-peptide had an inhibiting effect on signal transduction on hormone dependent breast cancer cells and if it was capable of preventing the Src from binding to its intracellular membrane receptor. The third aim was to discover if Val201-peptide was able to inhibit the estrogen-related ERK2 stimulation.

The project started with culturing breast cancer cells using the MCF-7 cell line. After obtaining an adequate quantity of cells they were laid to 24-well plates for the experiment. The cells were pre-disposed to different concentrations of Val201-peptide and estrogen. The exposure time was varied as well. The samples were then analyzed determining their total protein level and changes in total ERK and phospholyrated Src and ERK levels.

The results suggested that Val201-peptide is a potential anti-cancer drug for breast cancer. It was found that the Val201-peptide might be able to prevent the Src from binding to its intracellular receptor and therefore the ERK2 stimulation can be inhibited. It seems that Val201-peptide has an inhibiting effect on signal transduction but further research is required.