Mikrogliasolujen fluoresenssivärjäykset hiiren kelluvista aivokudosleikkeistä: immunohistokemiallinen värjäysmenetelmä osana Alzheimerin taudin tutkimusta
Petra, Mäkinen (2023)
2023
All rights reserved. This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2023052614488
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2023052614488
Tiivistelmä
Alzheimerin tauti (AT) on yleisin dementoiva sairaus maailmassa ja sairastuvuus lisääntyy dramaattisesti väestön ikääntyessä. Tällä hetkellä tähän kuolemaan johtavaan sairauteen ei ole parantavaa tai sitä estävää hoitoa. Nykytietämyksen mukaan, sairauteen liittyvät patologiset muutokset alkavat jo parikymmentä vuotta ennen ensimmäisiä näkyviä oireita ja sairaus etenee vaiheittain kohti hermosolujen tuhoa.
GWAS (genome-wide association studies) tutkimusmenetelmien myötä uusia Alzheimerin taudin riskiä lisääviä tai sitä vähentäviä riskigeenejä on löytynyt. Monet niistä ilmentyvät mikrogliasoluissa. Tähän pohjautuen PLCy2 (Fosfolipaasi C Gamma 2) - entsyymiä koodaava PLCG2 geeni on tärkeä, sillä sen harvinainen variantti, P522R, ehkäisee riskiä sairastua AT:in ja muihin hermorappeumasairauksiin. Merkittävää on myös, että PLCy2 P522R-variantti lisää tervettä vanhenemista ja pidentää elinikää. Lisäksi tämän suojaavan variantin toiminnan tutkiminen mikrogliasoluissa voi avata uusia mahdollisuuksia AT parempaan diagnostiikkaan ja hoitoon tulevaisuudessa.
Tämä opinnäytetyö oli tutkimuksellista kehittämistä ja pohjautui Itä-Suomen yliopistossa meneillään olevan PLCy2-P522R hankkeen immunohistokemialliseen osioon. Työn tarkoituksena oli kehittää hiiren kelluvien aivokudosleikkeiden värjäyspiste valmistamalla aivokudosleikkeitä ja värjäämällä ne immunohistokemiallisesti mikrogliasoluille spesifisillä fluoresoivilla vasta-aineilla. Opinnäytetyön tavoitteena oli saada tietoa suojaavan variantin P522R toiminnasta ja aineenvaihdunnasta mikrogliasoluissa hyödyntämällä työssä kehitettyä värjäysmenetelmää.
Opinnäytetyön aikana testatut kelluvien leikkeiden mikrogliasolujen värjäykset onnistuivat hyvin ja alustavat tulokset ovat yhteneväiset muihin suojaavan P522R variantin tutkimuksiin verrattuna. Kelluvien leikkeiden värjäysmetodin pystytys ja käyttöönotto palvelee molekyyligenetiikan tutkimusryhmän tarpeita ja tuo käyttökelpoisen lisän ryhmän monipuolisiin tutkimusmenetelmiin.
GWAS (genome-wide association studies) tutkimusmenetelmien myötä uusia Alzheimerin taudin riskiä lisääviä tai sitä vähentäviä riskigeenejä on löytynyt. Monet niistä ilmentyvät mikrogliasoluissa. Tähän pohjautuen PLCy2 (Fosfolipaasi C Gamma 2) - entsyymiä koodaava PLCG2 geeni on tärkeä, sillä sen harvinainen variantti, P522R, ehkäisee riskiä sairastua AT:in ja muihin hermorappeumasairauksiin. Merkittävää on myös, että PLCy2 P522R-variantti lisää tervettä vanhenemista ja pidentää elinikää. Lisäksi tämän suojaavan variantin toiminnan tutkiminen mikrogliasoluissa voi avata uusia mahdollisuuksia AT parempaan diagnostiikkaan ja hoitoon tulevaisuudessa.
Tämä opinnäytetyö oli tutkimuksellista kehittämistä ja pohjautui Itä-Suomen yliopistossa meneillään olevan PLCy2-P522R hankkeen immunohistokemialliseen osioon. Työn tarkoituksena oli kehittää hiiren kelluvien aivokudosleikkeiden värjäyspiste valmistamalla aivokudosleikkeitä ja värjäämällä ne immunohistokemiallisesti mikrogliasoluille spesifisillä fluoresoivilla vasta-aineilla. Opinnäytetyön tavoitteena oli saada tietoa suojaavan variantin P522R toiminnasta ja aineenvaihdunnasta mikrogliasoluissa hyödyntämällä työssä kehitettyä värjäysmenetelmää.
Opinnäytetyön aikana testatut kelluvien leikkeiden mikrogliasolujen värjäykset onnistuivat hyvin ja alustavat tulokset ovat yhteneväiset muihin suojaavan P522R variantin tutkimuksiin verrattuna. Kelluvien leikkeiden värjäysmetodin pystytys ja käyttöönotto palvelee molekyyligenetiikan tutkimusryhmän tarpeita ja tuo käyttökelpoisen lisän ryhmän monipuolisiin tutkimusmenetelmiin.