Hormoniyhdisteiden määrittäminen eläinperäisistä virtsanäytteistä GC-MS/MS-laitteella
Pärnänen, Jinetta (2023)
2023
All rights reserved. This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2023100426859
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2023100426859
Tiivistelmä
Opinnäytetyö tehtiin Ruokaviraston Helsingin toimipisteen kemian yksikössä. Työn tavoitteena oli validoida uusi laboratorion sisäinen menetelmä synteettisten hormoniyhdisteiden määrittämiseen eläinperäisistä virtsanäytteistä kaasukromatografia-tandemmassaspektrometrialla. Validointi suoritettiin 14 eri hormoniyhdisteelle. Yhdisteet olivat steroideja, stilbeenejä ja stilbeenijohdannaisia.
Hormonimenetelmä validoitiin komission täytäntöönpanoasetuksen (EU) 2021/808 mukaisesti. Validointi toteutettiin analysoimalla neljä validointisarjaa. Ensimmäisessä validointisarjassa tutkittiin matriisiefektiä ja kolmessa viimeisessä sarjassa lisäysnäytteitä, jotka väkevöitiin hormonien käyttöliuoksilla vastaamaan 1,5-, 2- ja 3-kertaisesti alinta kalibrointitasoa (0,2 µg/kg). Näytteiden esikäsittely oli monivaiheinen. Näytteet hydrolysoitiin, ulossuolattiin, uutettiin eri tavoin ja derivatisoitiin sekä MSTFA:lla että HFBA:lla. Analyysitekniikkana käytettiin kaasukromatografian ja tandemmassaspektrometrian yhdistelmää, jossa ionisaatiotekniikkana toimi elektroni-ionisaatio.
Validoinnissa tutkittiin seuraavia validointiparametreja: toistettavuus, uusittavuus, oikeellisuus, päätösraja CCα, lineaarisuus ja mittausalue. Hormoniyhdisteille määritetyt CCα-päätösrajat olivat pääsääntöisesti 0,40–0,45 µg/kg. Menetelmän oikeellisuutta kuvaavat saantoprosentit vaihtelivat 77–115 %. Menetelmän uusittavuus ja toistettavuus olivat hyviä suhteellisten keskihajontojen jäädessä alle asetuksen 2021/808 asettamien ohjeellisten raja-arvojen (uusittavuus < 30 % ja toistettavuus < 20 %). Yksittäisiä raja-arvon ylityksiä esiintyi, mutta poikkeamat olivat pieniä. Poikkeuksena α-nandroloni, jonka mittaustulosten toistettavuudessa oli ohjeellisen raja-arvon (20 %) ylityksiä kummallakin derivatisointitavalla.
Tutkittujen validointiparametrien osalta vaaditut suorituskykyarvot täyttyivät tai poikkeamat olivat pieniä. Tämän perusteella menetelmä soveltuu kyseisten hormonien määrittämiseen naudan virtsasta kaasukromatografi-tandemmassaspektrometrillä.
Hormonimenetelmä validoitiin komission täytäntöönpanoasetuksen (EU) 2021/808 mukaisesti. Validointi toteutettiin analysoimalla neljä validointisarjaa. Ensimmäisessä validointisarjassa tutkittiin matriisiefektiä ja kolmessa viimeisessä sarjassa lisäysnäytteitä, jotka väkevöitiin hormonien käyttöliuoksilla vastaamaan 1,5-, 2- ja 3-kertaisesti alinta kalibrointitasoa (0,2 µg/kg). Näytteiden esikäsittely oli monivaiheinen. Näytteet hydrolysoitiin, ulossuolattiin, uutettiin eri tavoin ja derivatisoitiin sekä MSTFA:lla että HFBA:lla. Analyysitekniikkana käytettiin kaasukromatografian ja tandemmassaspektrometrian yhdistelmää, jossa ionisaatiotekniikkana toimi elektroni-ionisaatio.
Validoinnissa tutkittiin seuraavia validointiparametreja: toistettavuus, uusittavuus, oikeellisuus, päätösraja CCα, lineaarisuus ja mittausalue. Hormoniyhdisteille määritetyt CCα-päätösrajat olivat pääsääntöisesti 0,40–0,45 µg/kg. Menetelmän oikeellisuutta kuvaavat saantoprosentit vaihtelivat 77–115 %. Menetelmän uusittavuus ja toistettavuus olivat hyviä suhteellisten keskihajontojen jäädessä alle asetuksen 2021/808 asettamien ohjeellisten raja-arvojen (uusittavuus < 30 % ja toistettavuus < 20 %). Yksittäisiä raja-arvon ylityksiä esiintyi, mutta poikkeamat olivat pieniä. Poikkeuksena α-nandroloni, jonka mittaustulosten toistettavuudessa oli ohjeellisen raja-arvon (20 %) ylityksiä kummallakin derivatisointitavalla.
Tutkittujen validointiparametrien osalta vaaditut suorituskykyarvot täyttyivät tai poikkeamat olivat pieniä. Tämän perusteella menetelmä soveltuu kyseisten hormonien määrittämiseen naudan virtsasta kaasukromatografi-tandemmassaspektrometrillä.