Salmonellakromogeenialustojen vertailututkimus : Salmonellakromogeenialustojen validointi ISO 6579:2002 -menetelmään

Abstract

Salmonellat ovat gramnegatiivisia suolistobakteereja, jotka voivat aiheuttaa ihmisellä suolisto- tai yleisinfektion. Tästä syystä elintarviketeollisuudessa salmonellamäärityksiä tehdään sekä tuotteista että tuotantoympäristöistä säännöllisesti. Näitä salmonellamäärityksiä tehdään pääsääntöisesti ISO 6579:2002: Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection of Salmonella spp. -viljelymenetelmän mukaisesti.

Tutkimuksen tarkoituksena oli korvata Valio Oy:llä ISO 6579:2002 -menetelmässä ksyloosi-lysiini-desoksikolaatti-agarin rinnalla käytettävä briljantinvihreä-fenolipuna laktoosi-sakkaroosi-agar, jollakin seuraavista kromogeenialustoista: ChromID Salmonella, Harlequin Salmonella ABC Medium, IBISA, Rambach, CHROMagar Salmonella Plus tai Brilliance Salmonella.

Ennen varsinaista maljavalidointia tehtiin alustava maljavertailu, jonka perusteella validoinnista poistettiin herkkyydeltään ja spesifisyydeltään huonommaksi havaitut alustat. Alustavan maljavertailun jälkeen karsittiin pois ChromID Salmonella, Harlequin Salmonella ABC Medium, IBISA ja Rambach -agarit varsinaisesta validointivaiheesta.

Tutkimuksen varsinaisessa validointivaiheessa verrattiin CHROMagar Salmonella Plus ja Brilliance Salmonella -alustojen toimivuutta ISO 6579:2002 -menetelmän mukaisessa viljelyssä keinotekoisesti kontaminoiduilla näytematriiseilla. Tulokseksi saatiin, että testatut kromogeenialustat olivat käytettyjä selektiivialustoja huomattavasti herkempiä ja spesifisempiä. Kromogeenialustojen keskinäisessä vertailussa paremmaksi osoittautui Oxoidin valmistama ja Fisher Scientificin toimittama Brilliance Salmonella -malja.

Salmonella are Gram-negative intestinal bacteria that can cause an intestinal inflammation or sepsis in humans. Therefore, salmonella tests are constantly performed on products and production environments in the food industry. These salmonella tests are conducted mainly by a method specified in the ISO 6579:2002 standard Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection of Salmonella spp -culture.

The aim of this validation project was to substitute Brilliant Green Phenol Red Lactose Sucrose -agar, used parallel with Xylose Lysine Deoxycholate -agar in the ISO 6579:2002 method of Valio Oy, with one of the subsequent chromogenic media: ChromID Salmonella, Harlequin Salmonella ABC Medium, IBISA, Rambach, CHROMagar Salmonella Plus, or Brilliance Salmonella.

Prior to the validation, a preliminary plate comparison was made, which resulted in the exclusion of insensitive and unspecific media. On the basis of the results of the preliminary plate comparison, ChromID Salmonella, Harlequin Salmonella ABC Medium, IBISA and Rambach agars were excluded from the actual validation stage of the project.

At the actual validation stage of the thesis project the functionality of CHROMagar Salmonella Plus and Brilliance Salmonella media were compared by using these agars as plating media in the ISO 6579:2002 method when analyzing artificially contaminated sample matrixes. The results obtained indicated that the chromogenic media were more sensitive and specific than the selective media that was previously used in the ISO 6579:2002 method by Valio Oy. When comparing the chromogenic media with each other, Brilliance Salmonella medium, manufactured by Oxoid, proved to be a better medium than CHROMagar Salmonella Plus, manufactured by CHROMagar.